科研服務(wù) 時(shí)間：2020-07-20 17:34:00 瀏覽：4213次
新的化合物可能引起各類組織器官的毒性損傷，這些毒性可以在相應(yīng)的細(xì)胞模型中進(jìn)行早期檢測(cè)，為藥物研發(fā)提供重要參考資料。
威斯騰生物以科技服務(wù)為起點(diǎn)，擁有完善的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)平臺(tái)、先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)、標(biāo)準(zhǔn)的操作流程、優(yōu)質(zhì)的合作平臺(tái)和強(qiáng)大的科學(xué)家網(wǎng)絡(luò)，為國(guó)內(nèi)外科研工作者和機(jī)構(gòu)提供專業(yè)的科研技術(shù)合作和轉(zhuǎn)化服務(wù)指導(dǎo)。能夠?yàn)榭蛻籼峁┤娴乃幬锒拘詸z測(cè)服務(wù)，通過高通量/高內(nèi)涵毒性篩選、MTT/cck8等方法，去檢測(cè)藥物的毒性，包含了肝臟毒性、心臟毒性、腎毒性等。
藥物毒性檢測(cè)方法：
高內(nèi)涵/高通量篩選：
高內(nèi)涵篩選(HCS)是一套自動(dòng)化分析方法，利用整合的顯微鏡、圖像處理技術(shù)及可視化工具從細(xì)胞或細(xì)胞群中提取數(shù)據(jù)，獲得定量分析結(jié)果。HCS一般應(yīng)用于高通量的樣品熒光成像，提供定量分析結(jié)果。此外，HCS能夠結(jié)合單個(gè)細(xì)胞的多重檢測(cè)結(jié)果，同時(shí)分析單次實(shí)驗(yàn)中的多個(gè)細(xì)胞亞群。
高通量篩選(HTS)是以微板形式作為實(shí)驗(yàn)工具載體，以自動(dòng)化操作系統(tǒng)執(zhí)行試驗(yàn)過程，同一時(shí)間檢測(cè)數(shù)以千萬的樣品，并得到的相應(yīng)數(shù)據(jù)庫(kù)支持運(yùn)轉(zhuǎn)，具有微量、快速、靈敏、準(zhǔn)確的特點(diǎn)。
MTT/CCK8檢測(cè)：
MTT為黃色化合物，是一種接受氫離子的染料?；罴?xì)胞在琥珀酸脫氫酶和細(xì)胞色素c的作用下四唑環(huán)開裂，生成藍(lán)色的甲月替結(jié)晶并沉積在細(xì)胞中，甲月替結(jié)晶的生成量?jī)H僅與活細(xì)胞數(shù)目成正比（死細(xì)胞中的琥珀酸脫氫酶消失，不能還原MTT）。還原生成的甲月替結(jié)晶可在含50%的N,N-二甲基甲酰胺、20%的十二甲基磺酸鈉（PH 4.7）或10%酸化十二甲基磺酸鈉（PH 4.7）的溶液中溶解。利用酶標(biāo)儀測(cè)定490nm波長(zhǎng)處的光密度測(cè)出OD值，即反映活細(xì)胞數(shù)目。也可利用DMSO（二甲基亞砜）來溶解。用DMSO之前要盡量去掉培養(yǎng)液，一遍DMSO溶解甲月替顆粒，進(jìn)行比色測(cè)定。
CCK-8（cell-counting kit-8）檢測(cè)試劑盒是應(yīng)用WST-8取代MTT被還原，WST-8是一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan。WST-8產(chǎn)生的formazan比XTT和MTS產(chǎn)生的formazan更易溶解。且WST-8相較XTT和MTS化學(xué)性狀更穩(wěn)定， 因此實(shí)驗(yàn)結(jié)果相對(duì)更加穩(wěn)定。此外，WST-8相較MTT、XTT，線性范圍相對(duì)寬，靈敏度更高。
當(dāng)細(xì)胞增殖得越多越快，則formazan產(chǎn)生量越多，顏色越深；反之，當(dāng)內(nèi)外因造成的細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺。對(duì)于同樣的細(xì)胞，顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)目呈線性關(guān)系。應(yīng)用酶標(biāo)儀測(cè)定吸光值并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)算便可以獲得細(xì)胞增殖（活性）相關(guān)數(shù)據(jù)。
服務(wù)流程
威斯騰生物服務(wù)項(xiàng)目
| 分子生物學(xué)檢測(cè) | 蛋白質(zhì)與免疫學(xué) | 動(dòng)物實(shí)驗(yàn) |
| 實(shí)時(shí)熒光定量PCR | 單克隆抗體制備 | 帕金森疾病模型 |
| 免疫共沉淀（Co-IP） | 多克隆抗體制備 | 抑郁癥動(dòng)物模型 |
| ELISA（酶聯(lián)免疫吸附法）技術(shù) | Western-blot 實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 脊髓損傷模型 |
| 生化指標(biāo)檢測(cè) | 蛋白雙向電泳實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 腦外損傷模型 |
| 雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè) | 原核蛋白表達(dá)純化 | 骨神經(jīng)損傷模型 |
| 染色質(zhì)免疫共沉淀（ChIP） | 真核蛋白表達(dá)純化 | 心肌缺血模型 |
| GST pull Down | ITRAQ定量蛋白質(zhì)組學(xué) | 心力衰竭模型 |
| SLAC蛋白組學(xué) | 肺動(dòng)脈高血壓動(dòng)物模型 | |
| 高血壓模型 | ||
| 病毒包裝純化 | 實(shí)驗(yàn)課題整體外包 | 粥樣動(dòng)脈硬化模型 |
| 過表達(dá)/干擾慢病毒包裝純化 | 整體課題外包 | 大腦中動(dòng)脈阻塞模型 |
| 過表達(dá)/干擾腺病毒包裝純化 | 細(xì)胞整體實(shí)驗(yàn)外包 | 慢性之氣管炎模型 |
| 逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝純化 | 動(dòng)物整體實(shí)驗(yàn)外包 | 過敏性哮喘模型 |
| 腺相關(guān)病毒包裝純化 | 肺炎大鼠模型 | |
| 肝炎-肝硬化-肝癌模型 | ||
| 蛋白芯片 | 原代細(xì)胞培養(yǎng) | 肝纖維化模型 |
| 細(xì)胞因子芯片 | 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng) | 膽結(jié)石模型 |
| 生長(zhǎng)因子芯片 | 脂肪干細(xì)胞培養(yǎng) | 急性胰腺炎模型 |
| 信號(hào)通路磷酸化水平檢測(cè)芯片 | 心肌成纖維細(xì)胞培養(yǎng) | 急性腎衰竭模型 |
| BioPlex懸浮芯片 | 軟骨細(xì)胞培養(yǎng) | 體內(nèi)血栓模型 |
| 生長(zhǎng)因子芯片 | 血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng) | 關(guān)節(jié)炎模型 |
| 炎癥因子芯片 | 神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng) | I型和II型糖尿病模型 |
| 血管生成因子芯片 | 內(nèi)皮組細(xì)胞原代培養(yǎng) | 裸鼠成瘤 |
| 凋亡因子芯片 | 基因編輯動(dòng)物 | |
| 趨化因子芯片 | 電生理相關(guān)服務(wù) | 動(dòng)物整體實(shí)驗(yàn)服務(wù) |
| HuProt TM 20K人類蛋白組芯片 | 膜片鉗實(shí)驗(yàn) | |
| 細(xì)胞生物學(xué) | 高通量測(cè)序 | 代謝組學(xué) |
| 細(xì)胞原代培養(yǎng) | mRNA測(cè)序 | 氣相色譜GC/MS |
| MTT檢測(cè) | LncRNA測(cè)序 | 液相色譜LC/MS |
| 細(xì)胞凋亡檢測(cè) | 全基因組測(cè)序 | 核磁共震NMR |
| 細(xì)胞周期檢測(cè) | RNA-Seq測(cè)序 | |
| 細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn) | 外顯子測(cè)序 | 影像學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn) |
| Transwell細(xì)胞遷移/侵襲 | 16s擴(kuò)增子測(cè)序 | Micro-CT |
| 流式分選 | Small RNA測(cè)序 | 小動(dòng)物活體成像 |
| CCK8/XTT檢測(cè) | 宏基因組測(cè)序 | 核磁共振 |
| 臺(tái)盼藍(lán)檢測(cè)細(xì)胞活性 | 單細(xì)胞測(cè)序 | PET-CT |
| 藥物篩選細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn) | circleRNA測(cè)序 | |
| 細(xì)胞粘附性檢測(cè) | 甲基化測(cè)序 | 基因編輯動(dòng)物 |
| 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn) | 條件性敲除小鼠/大鼠 | |
| 細(xì)胞生物學(xué)整體實(shí)驗(yàn) | 全基因敲除小鼠/大鼠 | |
| 細(xì)胞成管實(shí)驗(yàn) | ||
| 病理學(xué)檢測(cè) | CRISPR/Cas9細(xì)胞敲除/敲入 | 基因芯片 |
| 掃描電鏡 | 基因定點(diǎn)突變細(xì)胞系 | LncRNA芯片 |
| 透射電鏡 | 單基因敲除細(xì)胞系 | miRNA芯片 |
| HE染色 | 多基因敲除細(xì)胞系 | mRNA芯片 |
| 免疫組化 | 目的基因敲入細(xì)胞系 | 甲基化芯片（限人和小鼠來源樣本） |
| Tunel（原位末端凋亡法）檢測(cè) | 報(bào)告基因敲入細(xì)胞系 | SNP芯片（限人和小鼠來源樣本） |
| 激光共聚焦 | miRNA/LncRNA敲除細(xì)胞系 | |
| 免疫熒光 | ||
| Masson染色 | CRISPR/Cas9動(dòng)物敲除/敲入 | |
| 原位雜交 | 基因敲除大鼠/小鼠 |
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| 熒光原位雜交 | 基因敲入大鼠/小鼠 |
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| 特殊染色（PSA、茜素紅、阿爾新藍(lán)等） |
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| 行為學(xué)檢測(cè) | 藥物篩選服務(wù)項(xiàng)目 | 藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
| 水迷宮實(shí)驗(yàn) | 高通量自動(dòng)藥物篩選平臺(tái) | 神經(jīng)系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
| 曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn) | 細(xì)胞高內(nèi)涵藥物篩選平臺(tái) | 抗腫瘤藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
| 重復(fù)性刻板行為檢測(cè) | 蛋白質(zhì)組學(xué)靶標(biāo)研發(fā)平臺(tái) | 心血管系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
| 動(dòng)物跑臺(tái)檢測(cè) | 分子藥理研究平臺(tái) | 泌尿系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
| 強(qiáng)迫游泳 | 生物膜片鉗藥物篩選平臺(tái) | 內(nèi)分泌系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
| 常規(guī)藥物體外篩選 | 抗炎免疫藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
【本平臺(tái)合作項(xiàng)目】
分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、病理染色檢測(cè)、細(xì)胞敲除&敲入、模式與轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、SPF動(dòng)物保種、免疫學(xué)檢測(cè)、影像學(xué)檢測(cè)、原代培養(yǎng)、細(xì)胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測(cè)序、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量高內(nèi)涵篩選、藥效學(xué)評(píng)價(jià)、藥理毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)、慢病毒包裝與穩(wěn)轉(zhuǎn)株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析、知識(shí)產(chǎn)權(quán)服務(wù)！
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