威斯騰公眾號(hào)
科研服務(wù) 時(shí)間：2020-07-22 17:10:00 瀏覽：35445次
一、熒光免疫測(cè)定技術(shù)
將試劑抗原或試劑抗體用熒光素進(jìn)行標(biāo)記，試劑與標(biāo)本中相應(yīng)的抗體或抗原反應(yīng)后，測(cè)定復(fù)合物中的熒光素，這種免疫技術(shù)，稱(chēng)為免疫熒光素技術(shù)。
二、常見(jiàn)熒光素
⑴FITC；⑵RB200；⑶TRITC；⑷鑭系：Eu、Tb；⑸PE；⑹其它。
三、實(shí)驗(yàn)儀器與試劑
1、實(shí)驗(yàn)儀器：染色缸5個(gè)，玻片架1個(gè)，微波爐，濕盒，37℃恒溫箱，錫箔紙
2、實(shí)驗(yàn)試劑：二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ、無(wú)水酒精、30%雙氧水、檸檬酸鹽緩沖液（粉末，制備時(shí)候用雙蒸水定容，調(diào)PH）、PBS、BSA（粉末，用PBS溶解）、一抗（可用BSA溶解）、二抗（可用BSA溶解）、甘油、丙酮、多聚甲醛、Triton X-100(用PBS制備)
四、實(shí)驗(yàn)步驟
石蠟包埋切片處理方法：
1.二甲苯Ⅰ浸泡20分鐘
2.二甲苯Ⅱ浸泡20分鐘
3.梯度酒精（100、95、75）%脫水各5分鐘
4.雙蒸水沖洗浸泡1次，5分鐘
5.3%雙氧水浸泡，室溫5-10min，或37℃10min
6.抗原修復(fù)：切片浸入0.01M檸檬酸鹽緩沖液（PH6.0），微波爐加熱至沸騰后斷電。自然冷卻至室溫。
7.PBS沖洗2次，每次3分鐘
8.滴加5%BSA封閉液，室溫20min
9.甩去多余液體不洗
10.滴加適當(dāng)稀釋的一抗，超過(guò)組織邊緣2mm，置于濕盒內(nèi)4℃過(guò)夜或者37℃1小時(shí)或20℃2小時(shí)
11.取濕盒于37℃溫箱復(fù)溫，30min
12.滴加二抗，37℃溫箱孵育1小時(shí)（避光操作和存放）
13.PBS沖洗3次，每次2分鐘
14.甘油封片，甘油：水=1：1或甘油：PBS=9：1
15.4℃保存，最好及時(shí)激光共聚焦拍照
冰凍切片處理方法：
1.冰丙酮浸泡30s，自然晾干
2.滴加5%BSA封閉液，室溫20min
3.甩去多余液體不洗
4.滴加適當(dāng)稀釋的一抗，超過(guò)組織邊緣2mm，置于濕盒內(nèi)4℃過(guò)夜或者37℃1小時(shí)或20℃2小時(shí)
5.取濕盒于37℃溫箱復(fù)溫，30min
6.滴加二抗，37℃溫箱孵育1小時(shí)（避光操作和存放）
7.PBS沖洗3次，每次2分鐘
8.甘油封片，甘油：水=1：1或甘油：PBS=9：1
9.4℃保存，最好及時(shí)激光共聚焦拍照
結(jié)果展示
服務(wù)流程
威斯騰生物服務(wù)項(xiàng)目
| 分子生物學(xué)檢測(cè) | 蛋白質(zhì)與免疫學(xué) | 動(dòng)物實(shí)驗(yàn) |
| 實(shí)時(shí)熒光定量PCR | 單克隆抗體制備 | 帕金森疾病模型 |
| 免疫共沉淀（Co-IP） | 多克隆抗體制備 | 抑郁癥動(dòng)物模型 |
| ELISA（酶聯(lián)免疫吸附法）技術(shù) | Western-blot 實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 脊髓損傷模型 |
| 生化指標(biāo)檢測(cè) | 蛋白雙向電泳實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 腦外損傷模型 |
| 雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè) | 原核蛋白表達(dá)純化 | 骨神經(jīng)損傷模型 |
| 染色質(zhì)免疫共沉淀（ChIP） | 真核蛋白表達(dá)純化 | 心肌缺血模型 |
| GST pull Down | ITRAQ定量蛋白質(zhì)組學(xué) | 心力衰竭模型 |
| SLAC蛋白組學(xué) | 肺動(dòng)脈高血壓動(dòng)物模型 | |
| 高血壓模型 | ||
| 病毒包裝純化 | 實(shí)驗(yàn)課題整體外包 | 粥樣動(dòng)脈硬化模型 |
| 過(guò)表達(dá)/干擾慢病毒包裝純化 | 整體課題外包 | 大腦中動(dòng)脈阻塞模型 |
| 過(guò)表達(dá)/干擾腺病毒包裝純化 | 細(xì)胞整體實(shí)驗(yàn)外包 | 慢性之氣管炎模型 |
| 逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝純化 | 動(dòng)物整體實(shí)驗(yàn)外包 | 過(guò)敏性哮喘模型 |
| 腺相關(guān)病毒包裝純化 | 肺炎大鼠模型 | |
| 肝炎-肝硬化-肝癌模型 | ||
| 蛋白芯片 | 原代細(xì)胞培養(yǎng) | 肝纖維化模型 |
| 細(xì)胞因子芯片 | 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng) | 膽結(jié)石模型 |
| 生長(zhǎng)因子芯片 | 脂肪干細(xì)胞培養(yǎng) | 急性胰腺炎模型 |
| 信號(hào)通路磷酸化水平檢測(cè)芯片 | 心肌成纖維細(xì)胞培養(yǎng) | 急性腎衰竭模型 |
| BioPlex懸浮芯片 | 軟骨細(xì)胞培養(yǎng) | 體內(nèi)血栓模型 |
| 生長(zhǎng)因子芯片 | 血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng) | 關(guān)節(jié)炎模型 |
| 炎癥因子芯片 | 神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng) | I型和II型糖尿病模型 |
| 血管生成因子芯片 | 內(nèi)皮組細(xì)胞原代培養(yǎng) | 裸鼠成瘤 |
| 凋亡因子芯片 | 基因編輯動(dòng)物 | |
| 趨化因子芯片 | 電生理相關(guān)服務(wù) | 動(dòng)物整體實(shí)驗(yàn)服務(wù) |
| HuProt TM 20K人類(lèi)蛋白組芯片 | 膜片鉗實(shí)驗(yàn) | |
| 細(xì)胞生物學(xué) | 高通量測(cè)序 | 代謝組學(xué) |
| 細(xì)胞原代培養(yǎng) | mRNA測(cè)序 | 氣相色譜GC/MS |
| MTT檢測(cè) | LncRNA測(cè)序 | 液相色譜LC/MS |
| 細(xì)胞凋亡檢測(cè) | 全基因組測(cè)序 | 核磁共震NMR |
| 細(xì)胞周期檢測(cè) | RNA-Seq測(cè)序 | |
| 細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn) | 外顯子測(cè)序 | 影像學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn) |
| Transwell細(xì)胞遷移/侵襲 | 16s擴(kuò)增子測(cè)序 | Micro-CT |
| 流式分選 | Small RNA測(cè)序 | 小動(dòng)物活體成像 |
| CCK8/XTT檢測(cè) | 宏基因組測(cè)序 | 核磁共振 |
| 臺(tái)盼藍(lán)檢測(cè)細(xì)胞活性 | 單細(xì)胞測(cè)序 | PET-CT |
| 藥物篩選細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn) | circleRNA測(cè)序 | |
| 細(xì)胞粘附性檢測(cè) | 甲基化測(cè)序 | 基因編輯動(dòng)物 |
| 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn) | 條件性敲除小鼠/大鼠 | |
| 細(xì)胞生物學(xué)整體實(shí)驗(yàn) | 全基因敲除小鼠/大鼠 | |
| 細(xì)胞成管實(shí)驗(yàn) | ||
| 病理學(xué)檢測(cè) | CRISPR/Cas9細(xì)胞敲除/敲入 | 基因芯片 |
| 掃描電鏡 | 基因定點(diǎn)突變細(xì)胞系 | LncRNA芯片 |
| 透射電鏡 | 單基因敲除細(xì)胞系 | miRNA芯片 |
| HE染色 | 多基因敲除細(xì)胞系 | mRNA芯片 |
| 免疫組化 | 目的基因敲入細(xì)胞系 | 甲基化芯片（限人和小鼠來(lái)源樣本） |
| Tunel（原位末端凋亡法）檢測(cè) | 報(bào)告基因敲入細(xì)胞系 | SNP芯片（限人和小鼠來(lái)源樣本） |
| 激光共聚焦 | miRNA/LncRNA敲除細(xì)胞系 | |
| 免疫熒光 | ||
| Masson染色 | CRISPR/Cas9動(dòng)物敲除/敲入 | |
| 原位雜交 | 基因敲除大鼠/小鼠 | |
| 熒光原位雜交 | 基因敲入大鼠/小鼠 | |
| 特殊染色（PSA、茜素紅、阿爾新藍(lán)等） |
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| 行為學(xué)檢測(cè) | 藥物篩選服務(wù)項(xiàng)目 | 藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
| 水迷宮實(shí)驗(yàn) | 高通量自動(dòng)藥物篩選平臺(tái) | 神經(jīng)系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
| 曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn) | 細(xì)胞高內(nèi)涵藥物篩選平臺(tái) | 抗腫瘤藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
| 重復(fù)性刻板行為檢測(cè) | 蛋白質(zhì)組學(xué)靶標(biāo)研發(fā)平臺(tái) | 心血管系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
| 動(dòng)物跑臺(tái)檢測(cè) | 分子藥理研究平臺(tái) | 泌尿系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
| 強(qiáng)迫游泳 | 生物膜片鉗藥物篩選平臺(tái) | 內(nèi)分泌系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
| 常規(guī)藥物體外篩選 | 抗炎免疫藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
【本平臺(tái)合作項(xiàng)目】
分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、病理染色檢測(cè)、細(xì)胞敲除&敲入、模式與轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、SPF動(dòng)物保種、免疫學(xué)檢測(cè)、影像學(xué)檢測(cè)、原代培養(yǎng)、細(xì)胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測(cè)序、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量高內(nèi)涵篩選、藥效學(xué)評(píng)價(jià)、藥理毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)、慢病毒包裝與穩(wěn)轉(zhuǎn)株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析、知識(shí)產(chǎn)權(quán)服務(wù)！
【全國(guó)免費(fèi)熱線(xiàn)】400-675-6758
【電話(huà)】023-65316016,023-65316556
【郵箱】china-western@163.com
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