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蛋白質(zhì)譜分析

時(shí)間:2020-07-20 14:44:00 瀏覽:53600次

蛋白質(zhì)經(jīng)過(guò)蛋白酶的酶切消化后成肽段混合物,在質(zhì)譜儀中肽段混合物電離形成帶電離子,質(zhì)譜分析器的電場(chǎng)、磁場(chǎng)將具有特定質(zhì)量與電荷比值(即質(zhì)荷比,M/Z)的肽段離子分離開(kāi)來(lái),經(jīng)過(guò)檢測(cè)器收集分離的離子,確定每個(gè)離子的M/Z值。經(jīng)過(guò)質(zhì)量分析器可分析出每個(gè)肽段的M/Z,得到蛋白質(zhì)所有肽段的M/Z圖譜,即蛋白質(zhì)的一級(jí)質(zhì)譜峰圖。

通過(guò)實(shí)際譜圖和理論上蛋白質(zhì)經(jīng)過(guò)蛋白酶消化后產(chǎn)生的一級(jí)質(zhì)譜峰圖和二級(jí)質(zhì)譜峰圖進(jìn)行的比對(duì),進(jìn)行蛋白鑒定。


設(shè)備儀器:

美國(guó)安捷倫公司Agilent (xct-6330) 型號(hào)的液相色譜儀,MS為美國(guó)熱電公司的TSQ型號(hào)質(zhì)譜儀;質(zhì)譜儀采用ESI(電噴霧電離)離子源,MS/MS 串連四極桿分析器??稍诰€檢測(cè)極性有機(jī)化合物、核酸、多肽、小分子蛋白質(zhì)及其化學(xué)修飾產(chǎn)品的實(shí)際分子量,并對(duì)送檢樣品進(jìn)行分子量鑒定,純度及修飾效果分析。

質(zhì)量范圍M/Z 10~2,000 分辨率R=2M


設(shè)備應(yīng)用:

芯片/質(zhì)譜 (HPLC-Chip/MS) ——顯著提高了納流液-質(zhì)聯(lián)用分析結(jié)果的靈敏度,可靠性和分析速度 安捷倫推出了世界第一臺(tái)的基于微流控技術(shù)的納流液相色譜芯片-質(zhì)譜平臺(tái)。 這項(xiàng)技術(shù)將主要用于蛋白質(zhì)組學(xué)和藥物分析方面。其核心是采用可重復(fù)使用的聚合物液相色譜芯片取代傳統(tǒng)的液相色譜柱。這個(gè)平臺(tái)將多維色譜集成在一塊芯片上,采用插拔式設(shè)計(jì),操作簡(jiǎn)單與標(biāo)準(zhǔn)液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用儀相比, 它的其靈敏度提高了3,500倍。盡管芯片的體積很小,但是可以容納最長(zhǎng)20 厘米的有C18填料的色譜柱。液相色譜/芯片作為一個(gè)模塊與安捷倫的所有6000系列液-質(zhì)聯(lián)用儀完全兼容。 液相色譜-芯片技術(shù)主要應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)研究和藥物標(biāo)靶研究等領(lǐng)域。有關(guān)的應(yīng)用發(fā)表在許多國(guó)際知名的雜志上,如Analytical Chemistry; Electrophoresis, PNS上液相色譜芯片產(chǎn)品主要包括七種類型的芯片涵蓋大分子和小分子的應(yīng)用:
* 酶解蛋白質(zhì)鑒定芯片

* 酶解蛋白質(zhì)鑒定芯片

* 寡聚糖的芯片

* 直接進(jìn)樣芯片
* 小分子芯片

* 質(zhì)譜校正和診斷芯片

* 全蛋白質(zhì)分析芯片


測(cè)試范圍:
多肽、蛋白質(zhì)的電噴霧質(zhì)譜分子量測(cè)定以及天然產(chǎn)物分子、生物大分子、有機(jī)分子的質(zhì)譜測(cè)試和研究


送檢樣品要求:

樣品應(yīng)盡量不含鹽份、離子表面活性劑、去垢劑及一些難揮發(fā)性鹽。樣品送檢量、溶解方式以及未知可否做質(zhì)譜檢測(cè)的樣品可與我們的工作人員聯(lián)系以便提高檢測(cè)效率。(送樣單請(qǐng)附帶檢測(cè)樣品的品名及精確計(jì)算分子量)


送樣須知:

A:樣品量:50pmol干粉或1ug/uL以上(一般測(cè)試)、100pmol干粉或1ug/uL以上(MALDI串聯(lián)質(zhì)譜分析)、100ug干粉以上(二硫鍵分析、糖基化分析,磷酸化分析,其他修飾分析)、10ug干粉以上(SDS-PAGE或IEF);

B:鹽含量:揮發(fā)性無(wú)機(jī)鹽,<20mM,請(qǐng)勿使用PBS、SDS和尿素等質(zhì)譜干擾物質(zhì);

C:考馬斯亮藍(lán)染色樣品可全部接收,銀染過(guò)程中不得使用glutaraldehyde作為固定劑;

D:請(qǐng)告知樣品是否有修飾,并請(qǐng)注明修飾方式。


主要應(yīng)用 :
* 蛋白質(zhì)組學(xué)研究

* 寡聚糖和糖蛋白的研究

* 小分子化合物分析

* 藥物發(fā)現(xiàn)和研發(fā)

* 食品和環(huán)境樣品分析


威斯騰實(shí)驗(yàn)服務(wù)流程





威斯騰生物服務(wù)項(xiàng)目


分子生物學(xué)檢測(cè) 蛋白質(zhì)與免疫學(xué) 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
實(shí)時(shí)熒光定量PCR 單克隆抗體制備 帕金森疾病模型
免疫共沉淀(Co-IP 多克隆抗體制備 抑郁癥動(dòng)物模型
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附法)技術(shù) Western-blot 實(shí)驗(yàn)服務(wù) 脊髓損傷模型
生化指標(biāo)檢測(cè) 蛋白雙向電泳實(shí)驗(yàn)服務(wù) 腦外損傷模型
雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè) 原核蛋白表達(dá)純化 骨神經(jīng)損傷模型
染色質(zhì)免疫共沉淀(ChIP 真核蛋白表達(dá)純化 心肌缺血模型
GST pull Down ITRAQ定量蛋白質(zhì)組學(xué) 心力衰竭模型
SLAC蛋白組學(xué) 肺動(dòng)脈高血壓動(dòng)物模型
高血壓模型
病毒包裝 實(shí)驗(yàn)課題整體外包 粥樣動(dòng)脈硬化模型
過(guò)表達(dá)/干擾慢病毒包裝純化 整體課題外包 大腦中動(dòng)脈阻塞模型
過(guò)表達(dá)/干擾腺病毒包裝純化 細(xì)胞整體實(shí)驗(yàn)外包 慢性之氣管炎模型
逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝純化 動(dòng)物整體實(shí)驗(yàn)外包 過(guò)敏性哮喘模型
腺相關(guān)病毒包裝純化 肺炎大鼠模型
肝炎-肝硬化-肝癌模型
蛋白芯片 原代細(xì)胞培養(yǎng) 肝纖維化模型
細(xì)胞因子芯片 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng) 膽結(jié)石模型
BioPlex懸浮芯片 脂肪干細(xì)胞培養(yǎng) 急性胰腺炎模型
生長(zhǎng)因子芯片 心肌成纖維細(xì)胞培養(yǎng) 急性腎衰竭模型
炎癥因子芯片 軟骨細(xì)胞培養(yǎng) 體內(nèi)血栓模型
血管生成因子芯片 血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng) 關(guān)節(jié)炎模型
凋亡因子芯片 神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng) I型和II型糖尿病模型
趨化因子芯片 內(nèi)皮組細(xì)胞原代培養(yǎng) 裸鼠成瘤
HuProt TM 20K人類蛋白組芯片 基因編輯動(dòng)物
電生理相關(guān)服務(wù) 動(dòng)物整體實(shí)驗(yàn)服務(wù)
膜片鉗實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞生物學(xué)檢測(cè) 高通量測(cè)序 代謝組學(xué)
細(xì)胞原代培養(yǎng) mRNA測(cè)序 氣相色譜GC/MS
MTT檢測(cè) LncRNA測(cè)序 液相色譜LC/MS
細(xì)胞凋亡檢測(cè) 全基因組測(cè)序 核磁共震NMR
細(xì)胞周期檢測(cè) RNA-Seq測(cè)序
細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn) 外顯子測(cè)序 影像學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)
Transwell細(xì)胞遷移/侵襲 16s擴(kuò)增子測(cè)序 Micro-CT
流式分選 Small RNA測(cè)序 小動(dòng)物活體成像
CCK8/XTT檢測(cè) 宏基因組測(cè)序 核磁共振
臺(tái)盼藍(lán)檢測(cè)細(xì)胞活性 單細(xì)胞測(cè)序 PET-CT
藥物篩選細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn) circleRNA測(cè)序
細(xì)胞粘附性檢測(cè) 甲基化測(cè)序 基因編輯動(dòng)物
細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn) 條件性敲除小鼠/大鼠
細(xì)胞生物學(xué)整體實(shí)驗(yàn) 全基因敲除小鼠/大鼠
細(xì)胞成管實(shí)驗(yàn)
病理檢測(cè) CRISPR/Cas9細(xì)胞敲除/敲入 基因芯片
掃描電鏡 基因定點(diǎn)突變細(xì)胞系 LncRNA芯片
透射電鏡 單基因敲除細(xì)胞系 miRNA芯片
HE染色 多基因敲除細(xì)胞系 mRNA芯片
免疫組化 目的基因敲入細(xì)胞系 甲基化芯片(限人和小鼠來(lái)源樣本)
Tunel(原位末端凋亡法)檢測(cè) 報(bào)告基因敲入細(xì)胞系 SNP芯片(限人和小鼠來(lái)源樣本)
激光共聚焦 miRNA/LncRNA敲除細(xì)胞系
免疫熒光
Masson染色 CRISPR/Cas9動(dòng)物敲除/敲入
原位雜交 基因敲除大鼠/小鼠
熒光原位雜交 基因敲入大鼠/小鼠
特殊染色(PSA、茜素紅、阿爾新藍(lán)等)
行為學(xué)檢測(cè) 藥物篩選服務(wù)項(xiàng)目 藥效學(xué)評(píng)價(jià)
曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn) 高通量自動(dòng)藥物篩選平臺(tái) 抗腫瘤藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià)
重復(fù)性刻板行為檢測(cè) 細(xì)胞高內(nèi)涵藥物篩選平臺(tái) 心血管系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià)
動(dòng)物跑臺(tái)檢測(cè) 蛋白質(zhì)組學(xué)靶標(biāo)研發(fā)平臺(tái) 泌尿系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià)
強(qiáng)迫游泳 分子藥理研究平臺(tái) 內(nèi)分泌系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià)
生物膜片鉗藥物篩選平臺(tái) 抗炎免疫藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià)
常規(guī)藥物體外篩選


【本平臺(tái)合作項(xiàng)目】
分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、基因敲出/入、模式動(dòng)物、SPF動(dòng)物保種、病理學(xué)檢測(cè)、免疫學(xué)檢測(cè)、影像學(xué)檢測(cè)、原代培養(yǎng)、細(xì)胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測(cè)序、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量高內(nèi)涵篩選、藥效學(xué)評(píng)價(jià)、藥理毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)、慢病毒包裝與穩(wěn)轉(zhuǎn)株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析、知識(shí)產(chǎn)權(quán)服務(wù)!
【全國(guó)免費(fèi)熱線】400-675-6758
【電話】 023-65316016,023-65316556
【郵箱】 china-western@163.com
【官網(wǎng)網(wǎng)址】m.jnkqjc.com
【地址】 重慶市高新區(qū)二郎創(chuàng)業(yè)大道高科創(chuàng)業(yè)園D棟2樓   

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