
時(shí)間:2020-07-20 14:44:00 瀏覽:53600次
蛋白質(zhì)經(jīng)過(guò)蛋白酶的酶切消化后成肽段混合物,在質(zhì)譜儀中肽段混合物電離形成帶電離子,質(zhì)譜分析器的電場(chǎng)、磁場(chǎng)將具有特定質(zhì)量與電荷比值(即質(zhì)荷比,M/Z)的肽段離子分離開(kāi)來(lái),經(jīng)過(guò)檢測(cè)器收集分離的離子,確定每個(gè)離子的M/Z值。經(jīng)過(guò)質(zhì)量分析器可分析出每個(gè)肽段的M/Z,得到蛋白質(zhì)所有肽段的M/Z圖譜,即蛋白質(zhì)的一級(jí)質(zhì)譜峰圖。
通過(guò)實(shí)際譜圖和理論上蛋白質(zhì)經(jīng)過(guò)蛋白酶消化后產(chǎn)生的一級(jí)質(zhì)譜峰圖和二級(jí)質(zhì)譜峰圖進(jìn)行的比對(duì),進(jìn)行蛋白鑒定。
美國(guó)安捷倫公司Agilent
(xct-6330) 型號(hào)的液相色譜儀,MS為美國(guó)熱電公司的TSQ型號(hào)質(zhì)譜儀;質(zhì)譜儀采用ESI(電噴霧電離)離子源,MS/MS
串連四極桿分析器??稍诰€檢測(cè)極性有機(jī)化合物、核酸、多肽、小分子蛋白質(zhì)及其化學(xué)修飾產(chǎn)品的實(shí)際分子量,并對(duì)送檢樣品進(jìn)行分子量鑒定,純度及修飾效果分析。
質(zhì)量范圍M/Z
10~2,000 分辨率R=2M
設(shè)備應(yīng)用:
芯片/質(zhì)譜 (HPLC-Chip/MS)
——顯著提高了納流液-質(zhì)聯(lián)用分析結(jié)果的靈敏度,可靠性和分析速度 安捷倫推出了世界第一臺(tái)的基于微流控技術(shù)的納流液相色譜芯片-質(zhì)譜平臺(tái)。
這項(xiàng)技術(shù)將主要用于蛋白質(zhì)組學(xué)和藥物分析方面。其核心是采用可重復(fù)使用的聚合物液相色譜芯片取代傳統(tǒng)的液相色譜柱。這個(gè)平臺(tái)將多維色譜集成在一塊芯片上,采用插拔式設(shè)計(jì),操作簡(jiǎn)單與標(biāo)準(zhǔn)液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用儀相比,
它的其靈敏度提高了3,500倍。盡管芯片的體積很小,但是可以容納最長(zhǎng)20
厘米的有C18填料的色譜柱。液相色譜/芯片作為一個(gè)模塊與安捷倫的所有6000系列液-質(zhì)聯(lián)用儀完全兼容。
液相色譜-芯片技術(shù)主要應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)研究和藥物標(biāo)靶研究等領(lǐng)域。有關(guān)的應(yīng)用發(fā)表在許多國(guó)際知名的雜志上,如Analytical Chemistry; Electrophoresis,
PNS上液相色譜芯片產(chǎn)品主要包括七種類型的芯片涵蓋大分子和小分子的應(yīng)用:
* 酶解蛋白質(zhì)鑒定芯片
* 酶解蛋白質(zhì)鑒定芯片
* 寡聚糖的芯片
* 直接進(jìn)樣芯片
* 小分子芯片
* 質(zhì)譜校正和診斷芯片
* 全蛋白質(zhì)分析芯片
測(cè)試范圍:
多肽、蛋白質(zhì)的電噴霧質(zhì)譜分子量測(cè)定以及天然產(chǎn)物分子、生物大分子、有機(jī)分子的質(zhì)譜測(cè)試和研究
送檢樣品要求:
樣品應(yīng)盡量不含鹽份、離子表面活性劑、去垢劑及一些難揮發(fā)性鹽。樣品送檢量、溶解方式以及未知可否做質(zhì)譜檢測(cè)的樣品可與我們的工作人員聯(lián)系以便提高檢測(cè)效率。(送樣單請(qǐng)附帶檢測(cè)樣品的品名及精確計(jì)算分子量)
送樣須知:
A:樣品量:50pmol干粉或1ug/uL以上(一般測(cè)試)、100pmol干粉或1ug/uL以上(MALDI串聯(lián)質(zhì)譜分析)、100ug干粉以上(二硫鍵分析、糖基化分析,磷酸化分析,其他修飾分析)、10ug干粉以上(SDS-PAGE或IEF);
B:鹽含量:揮發(fā)性無(wú)機(jī)鹽,<20mM,請(qǐng)勿使用PBS、SDS和尿素等質(zhì)譜干擾物質(zhì);
C:考馬斯亮藍(lán)染色樣品可全部接收,銀染過(guò)程中不得使用glutaraldehyde作為固定劑;
D:請(qǐng)告知樣品是否有修飾,并請(qǐng)注明修飾方式。
主要應(yīng)用 :
* 蛋白質(zhì)組學(xué)研究
* 寡聚糖和糖蛋白的研究
* 小分子化合物分析
* 藥物發(fā)現(xiàn)和研發(fā)
* 食品和環(huán)境樣品分析
威斯騰實(shí)驗(yàn)服務(wù)流程
威斯騰生物服務(wù)項(xiàng)目
分子生物學(xué)檢測(cè) | 蛋白質(zhì)與免疫學(xué) | 動(dòng)物實(shí)驗(yàn) |
實(shí)時(shí)熒光定量PCR | 單克隆抗體制備 | 帕金森疾病模型 |
免疫共沉淀(Co-IP) | 多克隆抗體制備 | 抑郁癥動(dòng)物模型 |
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附法)技術(shù) | Western-blot 實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 脊髓損傷模型 |
生化指標(biāo)檢測(cè) | 蛋白雙向電泳實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 腦外損傷模型 |
雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè) | 原核蛋白表達(dá)純化 | 骨神經(jīng)損傷模型 |
染色質(zhì)免疫共沉淀(ChIP) | 真核蛋白表達(dá)純化 | 心肌缺血模型 |
GST pull Down | ITRAQ定量蛋白質(zhì)組學(xué) | 心力衰竭模型 |
SLAC蛋白組學(xué) | 肺動(dòng)脈高血壓動(dòng)物模型 | |
高血壓模型 | ||
病毒包裝 | 實(shí)驗(yàn)課題整體外包 | 粥樣動(dòng)脈硬化模型 |
過(guò)表達(dá)/干擾慢病毒包裝純化 | 整體課題外包 | 大腦中動(dòng)脈阻塞模型 |
過(guò)表達(dá)/干擾腺病毒包裝純化 | 細(xì)胞整體實(shí)驗(yàn)外包 | 慢性之氣管炎模型 |
逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝純化 | 動(dòng)物整體實(shí)驗(yàn)外包 | 過(guò)敏性哮喘模型 |
腺相關(guān)病毒包裝純化 | 肺炎大鼠模型 | |
肝炎-肝硬化-肝癌模型 | ||
蛋白芯片 | 原代細(xì)胞培養(yǎng) | 肝纖維化模型 |
細(xì)胞因子芯片 | 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng) | 膽結(jié)石模型 |
BioPlex懸浮芯片 | 脂肪干細(xì)胞培養(yǎng) | 急性胰腺炎模型 |
生長(zhǎng)因子芯片 | 心肌成纖維細(xì)胞培養(yǎng) | 急性腎衰竭模型 |
炎癥因子芯片 | 軟骨細(xì)胞培養(yǎng) | 體內(nèi)血栓模型 |
血管生成因子芯片 | 血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng) | 關(guān)節(jié)炎模型 |
凋亡因子芯片 | 神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng) | I型和II型糖尿病模型 |
趨化因子芯片 | 內(nèi)皮組細(xì)胞原代培養(yǎng) | 裸鼠成瘤 |
HuProt TM 20K人類蛋白組芯片 | 基因編輯動(dòng)物 | |
電生理相關(guān)服務(wù) | 動(dòng)物整體實(shí)驗(yàn)服務(wù) | |
膜片鉗實(shí)驗(yàn) | ||
細(xì)胞生物學(xué)檢測(cè) | 高通量測(cè)序 | 代謝組學(xué) |
細(xì)胞原代培養(yǎng) | mRNA測(cè)序 | 氣相色譜GC/MS |
MTT檢測(cè) | LncRNA測(cè)序 | 液相色譜LC/MS |
細(xì)胞凋亡檢測(cè) | 全基因組測(cè)序 | 核磁共震NMR |
細(xì)胞周期檢測(cè) | RNA-Seq測(cè)序 | |
細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn) | 外顯子測(cè)序 | 影像學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn) |
Transwell細(xì)胞遷移/侵襲 | 16s擴(kuò)增子測(cè)序 | Micro-CT |
流式分選 | Small RNA測(cè)序 | 小動(dòng)物活體成像 |
CCK8/XTT檢測(cè) | 宏基因組測(cè)序 | 核磁共振 |
臺(tái)盼藍(lán)檢測(cè)細(xì)胞活性 | 單細(xì)胞測(cè)序 | PET-CT |
藥物篩選細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn) | circleRNA測(cè)序 | |
細(xì)胞粘附性檢測(cè) | 甲基化測(cè)序 | 基因編輯動(dòng)物 |
細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn) | 條件性敲除小鼠/大鼠 | |
細(xì)胞生物學(xué)整體實(shí)驗(yàn) | 全基因敲除小鼠/大鼠 | |
細(xì)胞成管實(shí)驗(yàn) | ||
病理檢測(cè) | CRISPR/Cas9細(xì)胞敲除/敲入 | 基因芯片 |
掃描電鏡 | 基因定點(diǎn)突變細(xì)胞系 | LncRNA芯片 |
透射電鏡 | 單基因敲除細(xì)胞系 | miRNA芯片 |
HE染色 | 多基因敲除細(xì)胞系 | mRNA芯片 |
免疫組化 | 目的基因敲入細(xì)胞系 | 甲基化芯片(限人和小鼠來(lái)源樣本) |
Tunel(原位末端凋亡法)檢測(cè) | 報(bào)告基因敲入細(xì)胞系 | SNP芯片(限人和小鼠來(lái)源樣本) |
激光共聚焦 | miRNA/LncRNA敲除細(xì)胞系 | |
免疫熒光 | ||
Masson染色 | CRISPR/Cas9動(dòng)物敲除/敲入 | |
原位雜交 | 基因敲除大鼠/小鼠 | |
熒光原位雜交 | 基因敲入大鼠/小鼠 |
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特殊染色(PSA、茜素紅、阿爾新藍(lán)等) |
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行為學(xué)檢測(cè) | 藥物篩選服務(wù)項(xiàng)目 | 藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn) | 高通量自動(dòng)藥物篩選平臺(tái) | 抗腫瘤藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
重復(fù)性刻板行為檢測(cè) | 細(xì)胞高內(nèi)涵藥物篩選平臺(tái) | 心血管系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
動(dòng)物跑臺(tái)檢測(cè) | 蛋白質(zhì)組學(xué)靶標(biāo)研發(fā)平臺(tái) | 泌尿系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
強(qiáng)迫游泳 | 分子藥理研究平臺(tái) | 內(nèi)分泌系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
生物膜片鉗藥物篩選平臺(tái) | 抗炎免疫藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) | |
常規(guī)藥物體外篩選 |
【本平臺(tái)合作項(xiàng)目】
分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、基因敲出/入、模式動(dòng)物、SPF動(dòng)物保種、病理學(xué)檢測(cè)、免疫學(xué)檢測(cè)、影像學(xué)檢測(cè)、原代培養(yǎng)、細(xì)胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測(cè)序、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量高內(nèi)涵篩選、藥效學(xué)評(píng)價(jià)、藥理毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)、慢病毒包裝與穩(wěn)轉(zhuǎn)株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析、知識(shí)產(chǎn)權(quán)服務(wù)!
【全國(guó)免費(fèi)熱線】400-675-6758
【電話】 023-65316016,023-65316556
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