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人類疾病的動物模型在醫(yī)學(xué)科學(xué)研究方面占有十分重要的地位。威斯騰生物動物中心經(jīng)過十余年的發(fā)展,累積了豐富的動物培養(yǎng)和模型構(gòu)建經(jīng)驗(yàn),在動物模型構(gòu)建方法上摸索出獨(dú)有經(jīng)驗(yàn),常規(guī)動物模型構(gòu)建平均成功率98%以上,重難點(diǎn)模型(開胸/開顱術(shù)等)構(gòu)建平均成功率75%以上,形成了高效高質(zhì)量的動物模型構(gòu)建方法庫,可成功構(gòu)建上百種疾病動物模型。
大鼠MCAO模型構(gòu)建
動物自購回后保持動物房12h-12h晝夜交替,保持動物自由飲水、進(jìn)食,溫度23-25℃,適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后進(jìn)入實(shí)驗(yàn)。
參照改良Zea Longa線栓法構(gòu)建大鼠MCAO模型。大鼠術(shù)前12h禁食不禁水。
栓線插入完畢后,將預(yù)留的結(jié)扎線拉緊固定。醫(yī)用棉簽清理頸部血塊,縫合皮膚,酒精棉球消毒,將大鼠放回籠子。90min過后,麻醉大鼠,頸部消毒,打開一個(gè)小口,用眼科鑷夾住栓線固定處將栓線拔出約1cm實(shí)現(xiàn)血流再灌注,剪去多余栓線,逐層縫合。
1)分離頸部肌肉時(shí),兩側(cè)小塊肌肉叫鼓泡腺體(很多人誤認(rèn)為是甲狀腺),避免損傷導(dǎo)致出血。
3)分離血管時(shí),要盡量將血管剝離的干凈些,這樣在用眼科剪剪口時(shí)就不會誤剪外膜,且要剪一個(gè)斜行的切口。5)線栓是分幾次一點(diǎn)點(diǎn)插進(jìn)去的,而不是夾住線栓的中間部分一下子插進(jìn)去的,直到遇到輕微阻力停止插線。
Feeney 自由落體法實(shí)驗(yàn)鼠稱重,7%水合氯醛麻醉(5ml/kg),頭部備皮,俯臥固定于顱腦損傷儀上。手術(shù)區(qū)酒精棉球消毒,將大鼠頭頂部皮膚矢狀切開,剝離筋膜。以人字縫前3mm、冠狀縫右側(cè)3mm為圓心用顱骨鉆鉆孔并擴(kuò)大骨窗(直徑5mm),鉆孔過程需注意不能損壞硬腦膜,將致傷撞墊輕輕置于骨窗中央的硬腦膜上,用40g的砝碼自20cm高處沿滑桿自由落體落下打擊撞墊(沖擊力為800g·cm),造成大鼠右頂葉局限性腦挫裂傷。骨蠟封窗,縫合頭皮。
威斯騰實(shí)驗(yàn)服務(wù)流程
【本平臺合作項(xiàng)目】
分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、基因敲出/入、模式動物、SPF動物保種、病理學(xué)檢測、免疫學(xué)檢測、影像學(xué)檢測、原代培養(yǎng)、細(xì)胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量高內(nèi)涵篩選、藥效學(xué)評價(jià)、藥理毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)、慢病毒包裝與穩(wěn)轉(zhuǎn)株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析、知識產(chǎn)權(quán)服務(wù)!
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