科研服務(wù) 時間：2020-07-21 15:37:00 瀏覽：29066次
簡介：用限制性內(nèi)切酶切割細胞的整個基因組DNA，可以得到大量的基因組DNA片段，然后將這些DNA片段與載體連接，再轉(zhuǎn)化到細菌中去，讓宿主菌長成克隆。這樣，一個克隆內(nèi)的每個細胞的載體上都包含有特定的基因組DNA片段，整個克隆群體就包含基因組的全部基因片段總和稱為基因組文庫。基因文庫＝基因組文庫＋cDNA文庫 。
基因組文庫構(gòu)建步驟：
1、載體：
噬菌體：48.5kb,插入型(最多可容納9kb)、取代型(可容納 38-51kb，最適19-20kb)， EMBL, Charon 粘性質(zhì)粒(Cosmid)：4-6kb, 質(zhì)粒+噬菌體的性質(zhì)，可容納大片段的外源基因，最多可容納46kb。
酵母人工染色體克隆體系（YAC，Yeast Artificial Chromosome
Cloning System） 插入大小200—1000kb
2、載體DNA的制備： 高分子量的外源DNA 100-150kb
載體DNA酶切反應(yīng)-----載體臂的純化-----載體脫磷處理 （常用BamHI） （蔗糖密度梯度離心） （堿性磷酸酶）
3、連接和包裝：外源片段與兩臂之間的比例，包裝蛋白
4、感染宿主菌：選擇合適的宿主菌，LE392, NM538, NM539,
KW251等
5、基因組文庫的保存和擴增
6、測滴度：106fu以上
7、保存：氯仿4℃，7% DMSO -70℃
客戶提供：
動物的血或細胞、新鮮植物葉片、活體昆蟲或純化好的DNA樣品。
公司提供：
1、文庫（10%甘油菌）以及菌落效價（CFU/ml）；
2、隨機抽樣測序結(jié)果。
服務(wù)流程
服務(wù)項目
| 分子生物學(xué)類 | 蛋白質(zhì)與免疫學(xué) | 動物實驗 |
| 實時熒光定量PCR | 單克隆抗體制備 | 帕金森疾病模型 |
| 免疫共沉淀（Co-IP） | 多克隆抗體制備 | 抑郁癥動物模型 |
| ELISA（酶聯(lián)免疫吸附法）技術(shù) | Western-blot 實驗服務(wù) | 脊髓損傷模型 |
| 生化指標(biāo)檢測 | 蛋白雙向電泳實驗服務(wù) | 腦外損傷模型 |
| 雙熒光素酶報告基因檢測 | 原核蛋白表達純化 | 骨神經(jīng)損傷模型 |
| 染色質(zhì)免疫共沉淀（ChIP） | 真核蛋白表達純化 | 心肌缺血模型 |
| GST pull Down | ITRAQ定量蛋白質(zhì)組學(xué) | 心力衰竭模型 |
| SLAC蛋白組學(xué) | 肺動脈高血壓動物模型 | |
| 高血壓模型 | ||
| 病毒類 | 實驗課題整體外包 | 粥樣動脈硬化模型 |
| 過表達/干擾慢病毒包裝純化 | 整體課題外包 | 大腦中動脈阻塞模型 |
| 過表達/干擾腺病毒包裝純化 | 細胞整體實驗外包 | 慢性之氣管炎模型 |
| 逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝純化 | 動物整體實驗外包 | 過敏性哮喘模型 |
| 腺相關(guān)病毒包裝純化 | 肺炎大鼠模型 | |
| 肝炎-肝硬化-肝癌模型 | ||
| 蛋白芯片 | 原代細胞培養(yǎng) | 肝纖維化模型 |
| 細胞因子芯片 | 骨髓間充質(zhì)干細胞培養(yǎng) | 膽結(jié)石模型 |
| 生長因子芯片 | 脂肪干細胞培養(yǎng) | 急性胰腺炎模型 |
| 信號通路磷酸化水平檢測芯片 | 心肌成纖維細胞培養(yǎng) | 急性腎衰竭模型 |
| BioPlex懸浮芯片 | 軟骨細胞培養(yǎng) | 體內(nèi)血栓模型 |
| 生長因子芯片 | 血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng) | 關(guān)節(jié)炎模型 |
| 炎癥因子芯片 | 神經(jīng)元細胞培養(yǎng) | I型和II型糖尿病模型 |
| 血管生成因子芯片 | 內(nèi)皮組細胞原代培養(yǎng) | 裸鼠成瘤 |
| 凋亡因子芯片 | 基因編輯動物 | |
| 趨化因子芯片 | 電生理相關(guān)服務(wù) | 動物整體實驗服務(wù) |
| HuProt TM 20K人類蛋白組芯片 | 膜片鉗實驗 | |
| 細胞生物學(xué) | 高通量測序 | 代謝組學(xué) |
| 細胞原代培養(yǎng) | mRNA測序 | 氣相色譜GC/MS |
| MTT檢測 | LncRNA測序 | 液相色譜LC/MS |
| 細胞凋亡檢測 | 全基因組測序 | 核磁共震NMR |
| 細胞周期檢測 | RNA-Seq測序 | |
| 細胞克隆形成實驗 | 外顯子測序 | 影像學(xué)相關(guān)實驗 |
| Transwell細胞遷移/侵襲 | 16s擴增子測序 | Micro-CT |
| 流式分選 | Small RNA測序 | 小動物活體成像 |
| CCK8/XTT檢測 | 宏基因組測序 | 核磁共振 |
| 臺盼藍檢測細胞活性 | 單細胞測序 | PET-CT |
| 藥物篩選細胞學(xué)實驗 | circleRNA測序 | |
| 細胞粘附性檢測 | 甲基化測序 | 基因編輯動物 |
| 細胞劃痕實驗 | 條件性敲除小鼠/大鼠 | |
| 細胞生物學(xué)整體實驗 | 全基因敲除小鼠/大鼠 | |
| 細胞成管實驗 | ||
| 病理類 | CRISPR/Cas9細胞敲除/敲入 | 基因芯片 |
| 掃描電鏡 | 基因定點突變細胞系 | LncRNA芯片 |
| 透射電鏡 | 單基因敲除細胞系 | miRNA芯片 |
| HE染色 | 多基因敲除細胞系 | mRNA芯片 |
| 免疫組化 | 目的基因敲入細胞系 | 甲基化芯片（限人和小鼠來源樣本） |
| Tunel（原位末端凋亡法）檢測 | 報告基因敲入細胞系 | SNP芯片（限人和小鼠來源樣本） |
| 激光共聚焦 | miRNA/LncRNA敲除細胞系 | |
| 免疫熒光 | ||
| Masson染色 | CRISPR/Cas9動物敲除/敲入 | |
| 原位雜交 | 基因敲除大鼠/小鼠 | |
| 熒光原位雜交 | 基因敲入大鼠/小鼠 | |
| 特殊染色（PSA、茜素紅、阿爾新藍等） | ||
| 行為學(xué)檢測 | 藥物篩選服務(wù)項目 | 藥效學(xué)評價 |
| 水迷宮實驗 | 高通量自動藥物篩選平臺 | 神經(jīng)系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評價 |
| 曠場實驗 | 細胞高內(nèi)涵藥物篩選平臺 | 抗腫瘤藥物藥效學(xué)評價 |
| 重復(fù)性刻板行為檢測 | 蛋白質(zhì)組學(xué)靶標(biāo)研發(fā)平臺 | 心血管系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評價 |
| 動物跑臺檢測 | 分子藥理研究平臺 | 泌尿系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評價 |
| 強迫游泳 | 生物膜片鉗藥物篩選平臺 | 內(nèi)分泌系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評價 |
| 常規(guī)藥物體外篩選 | 抗炎免疫藥物藥效學(xué)評價 |
【本平臺合作項目】
分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)、基因敲出/入、模式動物、SPF動物保種、病理學(xué)檢測、免疫學(xué)檢測、影像學(xué)檢測、原代培養(yǎng)、細胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量高內(nèi)涵篩選、藥效學(xué)評價、藥理毒理學(xué)實驗、慢病毒包裝與穩(wěn)轉(zhuǎn)株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析、知識產(chǎn)權(quán)服務(wù)！
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