科研服務(wù) 時間：2020-07-22 17:07:00 瀏覽：48603次
一、激光共聚焦顯微鏡
激光掃描共聚焦顯微鏡是采用激光作為光源，在傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)上采用共軛聚焦原理和裝置，并利用計算機(jī)對所觀察的對象進(jìn)行數(shù)字圖象處理的一套觀察、分析和輸出系統(tǒng)。主要系統(tǒng)包括激光光源、自動顯微鏡、掃描模塊（包括共聚焦光路通道和針孔、掃描鏡、檢測器）、數(shù)字信號處理器、計算機(jī)以及圖象輸出設(shè)備（顯示器、彩色打印機(jī)）等。通過激光掃描共聚焦顯微鏡，可以對觀察樣品進(jìn)行斷層掃描和成像。因此，可以無損傷的觀察和分析細(xì)胞的三維空間結(jié)構(gòu)。同時，通過激光掃描共聚焦顯微鏡也是活細(xì)胞的動態(tài)觀察、多重免疫熒光標(biāo)記和離子熒光標(biāo)記觀察的有力工具。
儀器名稱：激光共聚焦顯微鏡
英文名：Leica TCS SP2 AOBS
型號與規(guī)格：TCS SP2 AOBS
二、激光共聚焦顯微鏡組成
1、共聚焦掃描系統(tǒng)
（1）獨立雙向掃描鏡。可以在正置顯微鏡和倒置顯微鏡之間迅速互換。儀器永久不用校正；可調(diào)的計算機(jī)控制單共焦針孔、孔徑20～600μm
（2）光譜掃描區(qū)400～850nm
（3）單線掃描頻率≥2000線/秒
（4）圖掃描率≥3幅/秒512×512pixels；≥20幅/秒512×32pixels
（5）掃描分辨率4096*4096掃描放大1～32X；多方位序列掃描方式；任意形狀區(qū)域掃描-范圍：≥22mm。
（6）光譜斜陡率 ≤1％
（7）透射光檢測器用于微分干涉相襯法檢驗
（8）低噪音 冷卻型光電倍增管（PNT）控測器12bi
2、激光裝置
具有多通道AOTF（四通道，八譜線），連接四種不同波長的可見光激光可以自動選擇激光譜線和功率，具等待功能。光纖耦合連接低能量激光。目前使用五激光，八譜線。Ar激光發(fā)生器 （458nm/5mw，476nm/5mw，488nm/20mw，514nm/20mw）-藍(lán)；He/Ne激光發(fā)生器（543nm/1.2mw）-綠；He/Ne激光發(fā)生器（633nm/10mw，594nm/2mv）-紅，紫外激光發(fā)生器（405nm/25mv）
3、顯微鏡：DMIRE2倒置電動熒光顯微鏡，擁有10x，20x，40x干鏡以及63x，100x油鏡。配置電動編碼物鏡轉(zhuǎn)座，Z軸電動驅(qū)動和干涉相襯的編碼棱鏡轉(zhuǎn)輪。
4、計算機(jī)工作站
WindowsXP操作系統(tǒng)，8個同步接收器通道，12bit同步數(shù)字轉(zhuǎn)換，超寬的SCSI電腦介面，高性能的電腦工作站，兩個監(jiān)視器，計算機(jī)彩色顯示
主要附件和功能：
觀察細(xì)胞精細(xì)結(jié)構(gòu)。用于檢測各種染色，非染色和熒光標(biāo)記的組織和細(xì)胞等，在可見光范圍內(nèi)熒光的定位定量分析，組織光學(xué)切片，基因染色體定位，基因亞細(xì)胞定位，離子通道研究．
三、檢測的優(yōu)勢
與傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡相比，主要解決了生物樣品結(jié)構(gòu)相互重疊影響觀察的問題，并可形成清晰的三維圖象。在檢測方面的主要優(yōu)勢有：
1、對活細(xì)胞和組織或細(xì)胞切片進(jìn)行連續(xù)掃描，可獲得精細(xì)的單個或一群細(xì)胞或者觀察到局部組織的各個層面結(jié)構(gòu)（包括細(xì)胞特異結(jié)構(gòu)—細(xì)胞骨架、染色體、細(xì)胞器和細(xì)胞膜系統(tǒng)，樣品的深層結(jié)構(gòu)）的三維圖像。
2、細(xì)胞內(nèi)離子熒光標(biāo)記，單標(biāo)記或三奈記，檢測細(xì)胞內(nèi)如PH和鈉、鈣、鎂等離子濃度的比率測定及動態(tài)變化。
3、熒光標(biāo)記探頭標(biāo)記的活細(xì)胞或切片標(biāo)本的活細(xì)胞生物物質(zhì)，膜標(biāo)記、免疫物質(zhì)、免疫反應(yīng)、受體或配體，核酸等觀察；可以在同一張樣品上進(jìn)行同時多重物質(zhì)標(biāo)記，同時觀察；
4、熒光檢測快、激發(fā)光強(qiáng)度精確控制、光漂白和熒光淬滅作用小；
5、對細(xì)胞檢測無損傷、精確、準(zhǔn)確、可靠和優(yōu)良重復(fù)性；數(shù)據(jù)圖象可及時輸出或長期儲存。
四、樣品要求
樣品制備無特殊要求；各種染色、非染色、熒光標(biāo)記的組織（包括活組織）、培養(yǎng)細(xì)胞、粘附細(xì)胞、細(xì)胞涂片、石蠟切片、冰凍切片。
五、應(yīng)用領(lǐng)域
1、細(xì)胞生物學(xué)：細(xì)胞結(jié)構(gòu)、細(xì)胞骨架、細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)、流動性、受體、細(xì)胞器結(jié)構(gòu)和分布變化、細(xì)胞凋亡；
2、生物化學(xué)：酶、核酸、FISH（熒光原位雜交）、受體分析
3、藥理學(xué)：藥物對細(xì)胞的作用及其動力學(xué)；
4、生理學(xué)：膜受體、離子通道、細(xì)胞內(nèi)離子含量、分布、動態(tài)；
5、遺傳學(xué)和組胚學(xué)：細(xì)胞生長、分化、成熟變化、細(xì)胞的三維結(jié)構(gòu)、染色體分析、基因表達(dá)、基因診斷；
6、神經(jīng)生物學(xué)：神經(jīng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)、神經(jīng)遞質(zhì)的成分、運輸和傳遞、遞質(zhì)受體、離子內(nèi)外流、 神經(jīng)組織（如大腦皮質(zhì)）結(jié)構(gòu)、細(xì)胞分布；
7、微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)：細(xì)菌、寄生蟲形態(tài)結(jié)構(gòu)（表面和內(nèi)部結(jié)構(gòu)）；
8、病理學(xué)及病理學(xué)臨床應(yīng)用：活檢標(biāo)本的快速診斷、腫瘤診斷、自身免疫性疾病的診斷，HIV，宮頸上皮細(xì)胞涂片診斷；
9、生物學(xué)、免疫學(xué)、環(huán)境醫(yī)學(xué)和營養(yǎng)學(xué)；
六、服務(wù)流程
威斯騰生物服務(wù)項目
| 分子生物學(xué)檢測 | 蛋白質(zhì)與免疫學(xué) | 動物實驗 |
| 實時熒光定量PCR | 單克隆抗體制備 | 帕金森疾病模型 |
| 免疫共沉淀（Co-IP） | 多克隆抗體制備 | 抑郁癥動物模型 |
| ELISA（酶聯(lián)免疫吸附法）技術(shù) | Western-blot 實驗服務(wù) | 脊髓損傷模型 |
| 生化指標(biāo)檢測 | 蛋白雙向電泳實驗服務(wù) | 腦外損傷模型 |
| 雙熒光素酶報告基因檢測 | 原核蛋白表達(dá)純化 | 骨神經(jīng)損傷模型 |
| 染色質(zhì)免疫共沉淀（ChIP） | 真核蛋白表達(dá)純化 | 心肌缺血模型 |
| GST pull Down | ITRAQ定量蛋白質(zhì)組學(xué) | 心力衰竭模型 |
| SLAC蛋白組學(xué) | 肺動脈高血壓動物模型 | |
| 高血壓模型 | ||
| 病毒包裝純化 | 實驗課題整體外包 | 粥樣動脈硬化模型 |
| 過表達(dá)/干擾慢病毒包裝純化 | 整體課題外包 | 大腦中動脈阻塞模型 |
| 過表達(dá)/干擾腺病毒包裝純化 | 細(xì)胞整體實驗外包 | 慢性之氣管炎模型 |
| 逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝純化 | 動物整體實驗外包 | 過敏性哮喘模型 |
| 腺相關(guān)病毒包裝純化 | 肺炎大鼠模型 | |
| 肝炎-肝硬化-肝癌模型 | ||
| 蛋白芯片 | 原代細(xì)胞培養(yǎng) | 肝纖維化模型 |
| 細(xì)胞因子芯片 | 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng) | 膽結(jié)石模型 |
| 生長因子芯片 | 脂肪干細(xì)胞培養(yǎng) | 急性胰腺炎模型 |
| 信號通路磷酸化水平檢測芯片 | 心肌成纖維細(xì)胞培養(yǎng) | 急性腎衰竭模型 |
| BioPlex懸浮芯片 | 軟骨細(xì)胞培養(yǎng) | 體內(nèi)血栓模型 |
| 生長因子芯片 | 血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng) | 關(guān)節(jié)炎模型 |
| 炎癥因子芯片 | 神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng) | I型和II型糖尿病模型 |
| 血管生成因子芯片 | 內(nèi)皮組細(xì)胞原代培養(yǎng) | 裸鼠成瘤 |
| 凋亡因子芯片 | 基因編輯動物 | |
| 趨化因子芯片 | 電生理相關(guān)服務(wù) | 動物整體實驗服務(wù) |
| HuProt TM 20K人類蛋白組芯片 | 膜片鉗實驗 | |
| 細(xì)胞生物學(xué) | 高通量測序 | 代謝組學(xué) |
| 細(xì)胞原代培養(yǎng) | mRNA測序 | 氣相色譜GC/MS |
| MTT檢測 | LncRNA測序 | 液相色譜LC/MS |
| 細(xì)胞凋亡檢測 | 全基因組測序 | 核磁共震NMR |
| 細(xì)胞周期檢測 | RNA-Seq測序 | |
| 細(xì)胞克隆形成實驗 | 外顯子測序 | 影像學(xué)相關(guān)實驗 |
| Transwell細(xì)胞遷移/侵襲 | 16s擴(kuò)增子測序 | Micro-CT |
| 流式分選 | Small RNA測序 | 小動物活體成像 |
| CCK8/XTT檢測 | 宏基因組測序 | 核磁共振 |
| 臺盼藍(lán)檢測細(xì)胞活性 | 單細(xì)胞測序 | PET-CT |
| 藥物篩選細(xì)胞學(xué)實驗 | circleRNA測序 | |
| 細(xì)胞粘附性檢測 | 甲基化測序 | 基因編輯動物 |
| 細(xì)胞劃痕實驗 | 條件性敲除小鼠/大鼠 | |
| 細(xì)胞生物學(xué)整體實驗 | 全基因敲除小鼠/大鼠 | |
| 細(xì)胞成管實驗 | ||
| 病理學(xué)檢測 | CRISPR/Cas9細(xì)胞敲除/敲入 | 基因芯片 |
| 掃描電鏡 | 基因定點突變細(xì)胞系 | LncRNA芯片 |
| 透射電鏡 | 單基因敲除細(xì)胞系 | miRNA芯片 |
| HE染色 | 多基因敲除細(xì)胞系 | mRNA芯片 |
| 免疫組化 | 目的基因敲入細(xì)胞系 | 甲基化芯片（限人和小鼠來源樣本） |
| Tunel（原位末端凋亡法）檢測 | 報告基因敲入細(xì)胞系 | SNP芯片（限人和小鼠來源樣本） |
| 激光共聚焦 | miRNA/LncRNA敲除細(xì)胞系 | |
| 免疫熒光 | ||
| Masson染色 | CRISPR/Cas9動物敲除/敲入 |
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| 原位雜交 | 基因敲除大鼠/小鼠 | |
| 熒光原位雜交 | 基因敲入大鼠/小鼠 | |
| 特殊染色（PSA、茜素紅、阿爾新藍(lán)等） |
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| 行為學(xué)檢測 | 藥物篩選服務(wù)項目 | 藥效學(xué)評價 |
| 水迷宮實驗 | 高通量自動藥物篩選平臺 | 神經(jīng)系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評價 |
| 曠場實驗 | 細(xì)胞高內(nèi)涵藥物篩選平臺 | 抗腫瘤藥物藥效學(xué)評價 |
| 重復(fù)性刻板行為檢測 | 蛋白質(zhì)組學(xué)靶標(biāo)研發(fā)平臺 | 心血管系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評價 |
| 動物跑臺檢測 | 分子藥理研究平臺 | 泌尿系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評價 |
| 強(qiáng)迫游泳 | 生物膜片鉗藥物篩選平臺 | 內(nèi)分泌系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評價 |
| 常規(guī)藥物體外篩選 | 抗炎免疫藥物藥效學(xué)評價 |
【本平臺合作項目】
分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、病理染色檢測、細(xì)胞敲除&敲入、模式與轉(zhuǎn)基因動物、SPF動物保種、免疫學(xué)檢測、影像學(xué)檢測、原代培養(yǎng)、細(xì)胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量高內(nèi)涵篩選、藥效學(xué)評價、藥理毒理學(xué)實驗、慢病毒包裝與穩(wěn)轉(zhuǎn)株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析、知識產(chǎn)權(quán)服務(wù)！
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