質(zhì)譜分析

中國(guó)生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)聯(lián)盟引進(jìn)美國(guó)安捷倫公司的液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀。形成了高通量、高靈敏度和高分辨率的規(guī)模化蛋白質(zhì)分析支撐技術(shù)體系，為促進(jìn)蛋白質(zhì)組學(xué)及相關(guān)研究的發(fā)展，共享先進(jìn)的技術(shù)資源，近年來(lái)生物質(zhì)譜實(shí)驗(yàn)室蛋白質(zhì)/多肽質(zhì)譜鑒定、生物工程藥物結(jié)構(gòu)確證和蛋白質(zhì)組學(xué)多項(xiàng)成熟的分析技術(shù)已為國(guó)內(nèi)外客戶提供了廣泛的服務(wù)。

設(shè)備儀器：

美國(guó)安捷倫公司Agilent （xct-6330） 型號(hào)的液相色譜儀，MS為美國(guó)熱電公司的TSQ型號(hào)質(zhì)譜儀；質(zhì)譜儀采用ESI（電噴霧電離）離子源，MS/MS 串連四極桿分析器。可在線檢測(cè)極性有機(jī)化合物、核酸、多肽、小分子蛋白質(zhì)及其化學(xué)修飾產(chǎn)品的實(shí)際分子量，并對(duì)送檢樣品進(jìn)行分子量鑒定，純度及修飾效果分析。

質(zhì)量范圍M/Z 10～2,000 分辨率R=2M

測(cè)試范圍：
多肽、蛋白質(zhì)的電噴霧質(zhì)譜分子量測(cè)定以及天然產(chǎn)物分子、生物大分子、有機(jī)分子的質(zhì)譜測(cè)試和研究

送檢樣品要求：樣品應(yīng)盡量不含鹽份、離子表面活性劑、去垢劑及一些難揮發(fā)性鹽。樣品送檢量、溶解方式以及未知可否做質(zhì)譜檢測(cè)的樣品可與我們的工作人員聯(lián)系以便提高檢測(cè)效率。

（送樣單請(qǐng)附帶檢測(cè)樣品的品名及精確計(jì)算分子量）

送樣須知：

A：樣品量：50pmol干粉或1ug/uL以上（一般測(cè)試）、100pmol干粉或1ug/uL以上（MALDI串聯(lián)質(zhì)譜分析）、100ug干粉以上（二硫鍵分析、糖基化分析，***酸化分析，其他修飾分析）、10ug干粉以上（SDS-PAGE或IEF）；

B：鹽含量：揮發(fā)性無(wú)機(jī)鹽，<20mM，請(qǐng)勿使用PBS、SDS和尿素等質(zhì)譜干擾物質(zhì)；

C：考馬斯亮藍(lán)染色樣品可全部接收，銀染過(guò)程中不得使用戊二醛作為固定劑；

D：請(qǐng)告知樣品是否有修飾，并請(qǐng)注明修飾方式。

主要應(yīng)用 :

* 蛋白質(zhì)組學(xué)研究 * 寡聚糖和糖蛋白的研究 * 小分子化合物分析

* 藥物發(fā)現(xiàn)和研發(fā) * 食品和環(huán)境樣品分析

檢測(cè)報(bào)告：

從收到樣品起1-2個(gè)工作日內(nèi)可給出樣品的檢測(cè)報(bào)告，以電子郵件的形式發(fā)給您并附帶檢測(cè)結(jié)果分析。包括結(jié)果有：一級(jí)質(zhì)譜：質(zhì)譜圖、肽段分子量、數(shù)據(jù)庫(kù)檢索結(jié)果； 二級(jí)質(zhì)譜：質(zhì)譜圖、肽段分子量、數(shù)據(jù)庫(kù)檢索結(jié)果、肽段氨基酸序列、修飾位點(diǎn)等。

脂質(zhì)組學(xué)分析

對(duì)脂類的準(zhǔn)確鑒定和絕對(duì)定量在脂質(zhì)代謝的綜合研究中起著重要的作用?；诜€(wěn)定同位素標(biāo)記內(nèi)標(biāo)（SIL-IS）及響應(yīng)因子（RF）建立的脂質(zhì)組全定量庫(kù)，可對(duì)Plasmenyl-glycerophosphatidylcholine（pPC）、Lysoglycerophosphatidylcholine（LPC）和Sphinganine（Sph）等多達(dá)34類脂質(zhì)進(jìn)行準(zhǔn)確定性以及絕對(duì)定量。相較于傳統(tǒng)的脂質(zhì)組學(xué)檢測(cè)方法需要添加 多種SIL-IS的弊端，我們通過(guò)引入RF使得我們的脂質(zhì)組全定量方法，在保持與傳統(tǒng)方法相當(dāng)定量精度以及日間重復(fù)性的基礎(chǔ)上，可定性定量物質(zhì)種類更多、通量更高。通過(guò)對(duì)我們包含76361種脂質(zhì)、181300張MS/MS二級(jí)質(zhì)譜圖的自建脂質(zhì)二級(jí)質(zhì)譜庫(kù)的檢索匹配，我們可以僅用單個(gè)SIL-IS，對(duì)生物樣本種數(shù)萬(wàn)種脂質(zhì)同時(shí)進(jìn)行準(zhǔn)確定性以及絕對(duì)定量，且上述工作均基于計(jì)算機(jī)程序自動(dòng)化運(yùn)作，高效便捷。

技術(shù)優(yōu)勢(shì)

脂質(zhì)檢測(cè)效率高：可實(shí)現(xiàn)單一SIL-IS同時(shí)高通量定性，絕對(duì)定量上萬(wàn)種脂質(zhì)；

專業(yè)團(tuán)隊(duì)檢測(cè)分析：通過(guò)計(jì)算機(jī)程序自動(dòng)化運(yùn)行。

樣本要求

植物組織 200-500 mg

動(dòng)物及臨床組織標(biāo)本 200 mg

血清、血漿 200 μL

微生物、細(xì)胞 1×107 cells

生物學(xué)重復(fù)

樣本數(shù)量：植物和微生物n≥6，動(dòng)物樣本n≥10，臨床樣本n≥30，所有重復(fù)樣本獨(dú)立分析。

檢測(cè)平臺(tái)

UHPLC-QTOF-MS（Agilent 1290 UHPLC-AB 6600/5600 MS）

UHPLC-QE-MS（Agilent 1290 UHPLC-Thermo Q Exactive Focus/Plus/HF）

檢測(cè)范圍

pPC、LPC、Sph、Cer、SM、Cer-p、PhytoSph和HexCer等34類脂質(zhì)

應(yīng)用方向

1、通過(guò)分析各種代謝性疾病的不同代謝途徑的脂質(zhì)成分變化，揭示出相關(guān)疾病發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中脂質(zhì)成分的功能和影響；

2、通過(guò)比較不同處理，生物樣本中脂質(zhì)成分的差異，探究脂質(zhì)成分的生物學(xué)功能。

威斯騰實(shí)驗(yàn)服務(wù)流程

威斯騰生物服務(wù)項(xiàng)目

分子生物學(xué)檢測(cè)	蛋白質(zhì)與免疫學(xué)	動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
實(shí)時(shí)熒光定量PCR	單克隆抗體制備	帕金森疾病模型
免疫共沉淀（Co-IP）	多克隆抗體制備	抑郁癥動(dòng)物模型
ELISA（酶聯(lián)免疫吸附法）技術(shù)	Western-blot 實(shí)驗(yàn)服務(wù)	脊髓損傷模型
生化指標(biāo)檢測(cè)	蛋白雙向電泳實(shí)驗(yàn)服務(wù)	腦外損傷模型
雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)	原核蛋白表達(dá)純化	骨神經(jīng)損傷模型
染色質(zhì)免疫共沉淀（ChIP）	真核蛋白表達(dá)純化	心肌缺血模型
GST pull Down	ITRAQ定量蛋白質(zhì)組學(xué)	心力衰竭模型
	SLAC蛋白組學(xué)	肺動(dòng)脈高血壓動(dòng)物模型
		高血壓模型
病毒包裝	實(shí)驗(yàn)課題整體外包	粥樣動(dòng)脈硬化模型
過(guò)表達(dá)/干擾慢病毒包裝純化	整體課題外包	大腦中動(dòng)脈阻塞模型
過(guò)表達(dá)/干擾腺病毒包裝純化	細(xì)胞整體實(shí)驗(yàn)外包	慢性之氣管炎模型
逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝純化	動(dòng)物整體實(shí)驗(yàn)外包	過(guò)敏性哮喘模型
腺相關(guān)病毒包裝純化		肺炎大鼠模型
		肝炎-肝硬化-肝癌模型
蛋白芯片	原代細(xì)胞培養(yǎng)	肝纖維化模型
細(xì)胞因子芯片	骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)	膽結(jié)石模型
BioPlex懸浮芯片	脂肪干細(xì)胞培養(yǎng)	急性胰腺炎模型
生長(zhǎng)因子芯片	心肌成纖維細(xì)胞培養(yǎng)	急性腎衰竭模型
炎癥因子芯片	軟骨細(xì)胞培養(yǎng)	體內(nèi)血栓模型
血管生成因子芯片	血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)	關(guān)節(jié)炎模型
凋亡因子芯片	神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)	I型和II型糖尿病模型
趨化因子芯片	內(nèi)皮組細(xì)胞原代培養(yǎng)	裸鼠成瘤
HuProt TM 20K人類蛋白組芯片		基因編輯動(dòng)物
	電生理相關(guān)服務(wù)	動(dòng)物整體實(shí)驗(yàn)服務(wù)
	膜片鉗實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞生物學(xué)檢測(cè)	高通量測(cè)序	代謝組學(xué)
細(xì)胞原代培養(yǎng)	mRNA測(cè)序	氣相色譜GC/MS
MTT檢測(cè)	LncRNA測(cè)序	液相色譜LC/MS
細(xì)胞凋亡檢測(cè)	全基因組測(cè)序	核磁共震NMR
細(xì)胞周期檢測(cè)	RNA-Seq測(cè)序
細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)	外顯子測(cè)序	影像學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)
Transwell細(xì)胞遷移/侵襲	16s擴(kuò)增子測(cè)序	Micro-CT
流式分選	Small RNA測(cè)序	小動(dòng)物活體成像
CCK8/XTT檢測(cè)	宏基因組測(cè)序	核磁共振
臺(tái)盼藍(lán)檢測(cè)細(xì)胞活性	單細(xì)胞測(cè)序	PET-CT
藥物篩選細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)	circleRNA測(cè)序
細(xì)胞粘附性檢測(cè)	甲基化測(cè)序	基因編輯動(dòng)物
細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)		條件性敲除小鼠/大鼠
細(xì)胞生物學(xué)整體實(shí)驗(yàn)		全基因敲除小鼠/大鼠
細(xì)胞成管實(shí)驗(yàn)
病理檢測(cè)	CRISPR/Cas9細(xì)胞敲除/敲入	基因芯片
掃描電鏡	基因定點(diǎn)突變細(xì)胞系	LncRNA芯片
透射電鏡	單基因敲除細(xì)胞系	miRNA芯片
HE染色	多基因敲除細(xì)胞系	mRNA芯片
免疫組化	目的基因敲入細(xì)胞系	甲基化芯片（限人和小鼠來(lái)源樣本）
Tunel（原位末端凋亡法）檢測(cè)	報(bào)告基因敲入細(xì)胞系	SNP芯片（限人和小鼠來(lái)源樣本）
激光共聚焦	miRNA/LncRNA敲除細(xì)胞系
免疫熒光
Masson染色	CRISPR/Cas9動(dòng)物敲除/敲入
原位雜交	基因敲除大鼠/小鼠
熒光原位雜交	基因敲入大鼠/小鼠
特殊染色（PSA、茜素紅、阿爾新藍(lán)等）
行為學(xué)檢測(cè)	藥物篩選服務(wù)項(xiàng)目	藥效學(xué)評(píng)價(jià)
曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)	高通量自動(dòng)藥物篩選平臺(tái)	抗腫瘤藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià)
重復(fù)性刻板行為檢測(cè)	細(xì)胞高內(nèi)涵藥物篩選平臺(tái)	心血管系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià)
動(dòng)物跑臺(tái)檢測(cè)	蛋白質(zhì)組學(xué)靶標(biāo)研發(fā)平臺(tái)	泌尿系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià)
強(qiáng)迫游泳	分子藥理研究平臺(tái)	內(nèi)分泌系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià)
	生物膜片鉗藥物篩選平臺(tái)	抗炎免疫藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià)
	常規(guī)藥物體外篩選

【本平臺(tái)合作項(xiàng)目】
分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、基因敲出/入、模式動(dòng)物、SPF動(dòng)物保種、病理學(xué)檢測(cè)、免疫學(xué)檢測(cè)、影像學(xué)檢測(cè)、原代培養(yǎng)、細(xì)胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測(cè)序、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量高內(nèi)涵篩選、藥效學(xué)評(píng)價(jià)、藥理毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)、慢病毒包裝與穩(wěn)轉(zhuǎn)株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析、知識(shí)產(chǎn)權(quán)服務(wù)！
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