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人類疾病的動物模型在醫(yī)學(xué)科學(xué)研究方面占有十分重要的地位。威斯騰生物動物中心經(jīng)過十余年的發(fā)展，累積了豐富的動物培養(yǎng)和模型構(gòu)建經(jīng)驗，在動物模型構(gòu)建方法上摸索出獨有經(jīng)驗，常規(guī)動物模型構(gòu)建平均成功率98%以上，重難點模型（開胸/開顱術(shù)等）構(gòu)建平均成功率75%以上,形成了高效高質(zhì)量的動物模型構(gòu)建方法庫，可成功構(gòu)建上百種疾病動物模型。

動脈粥樣硬化模型

常用的復(fù)制方法有下面幾種（包括高血脂模型）：
1．高膽固醇、高脂肪飼料喂養(yǎng)法：是目前比較常用的方法，特點是死亡率低，可長期觀察，但費時久。一般在家兔、鴿、雞等，經(jīng)數(shù)周喂養(yǎng)就可產(chǎn)生明顯的高脂血癥，經(jīng)數(shù)月就能形成早期的動脈粥樣硬化病變。大白鼠、小白鼠及犬則較難形成，如果飼料中增加蛋黃、膽酸和豬油等，可用促進作用。為了促進病變的形成，在高脂飼料中還可加入甲基硫氧嘧啶、丙基硫氧嘧啶、甲亢平、維生素D、蔗糖等。
具體復(fù)制方法：兔誘發(fā)模型：體重2kg左右，每天喂服膽固醇0.3g，4個月后肉眼可見主動脈粥樣硬化斑塊；若每天劑量增至0.5g，3個月后可出現(xiàn)斑塊；若增至每天1g，可縮為2個月。在飼料中加入15%蛋黃粉、0.5%膽固醇和5%豬油，經(jīng)3周后，將飼料中膽固醇減去，再喂3周，可使主動脈斑塊發(fā)生率達100%，血清膽固醇可長高至2000mg%。大白鼠誘發(fā)模型：喂服1～4%膽固醇、10%豬油、0.2%甲基硫氧嘧啶、86～89%基礎(chǔ)飼料，7～10天；或喂服10%蛋白黃粉、5%豬油、0.5%膽鹽、85%基礎(chǔ)飼料，7天后均可形成高膽固醇血癥。小白鼠誘發(fā)模型：雄性小白鼠飼以1%膽固醇及10%豬油的高脂飼料，7天后血清膽固醇即升為343±15mg；若在飼料中再加入0.3%的膽酸，連飼7天，血清膽固醇可高達530±36mg%。雞、鴿誘發(fā)模型：4～8周的萊克享雞，在飼料中加入1～2%膽固醇或15%的蛋黃粉，再加5～10%的豬油，經(jīng)過6～10周，血膽固醇升至1000～4000mg%，胸主動脈斑塊發(fā)生率達100%。鴿喂飼膽固醇3g/kg/天，加甲基硫氧嘧啶0.1g，可以產(chǎn)生較多動物斑塊。
2．免疫學(xué)方法：將大白鼠主動脈勻漿給兔注射，可引起血膽固醇、β-脂蛋白及甘油三脂升高。給兔注射馬血清10ml/kg/次，共4次，每次間隔17天，動脈內(nèi)膜損傷率為88%，冠狀動脈亦有粥樣硬化的病變；同時給予高膽固醇飼料，病變更加明顯。兔喂飼含1%膽固醇的飲料，靜脈注射牛血清白蛋白250mg/kg，可加速高膽固醇飼料引起的動脈內(nèi)膜病變形成。
3．注射兒茶酚胺類藥物法：給兔靜脈滴注Norepinephrine1mg/日，時間為30分鐘。一種方法是先點滴15分鐘，休息5分鐘后再滴15分鐘；另一方法是每次點滴5分鐘和休息5分鐘，反復(fù)6次。以上兩種方法持續(xù)兩周，均可引起主動脈病變，呈現(xiàn)血管壁中層彈性纖維拉長、劈裂或斷裂，病變中出現(xiàn)壞死及鈣化。
4．注入同型半胱氨酸法：給兔皮下注射同型半胱氨酸硫代內(nèi)脂（dl-homocysteine thiolactone）20～25mg/kg/日（以5%葡萄糖溶液配成1mg/ml的濃度），連續(xù)20～25天，成年兔及幼兔均可出現(xiàn)動脈粥樣硬化的典型病變。冠狀動脈管腔變窄、動脈壁內(nèi)膜肌細胞增生、纖維組織增生、彈力纖維斷裂、管壁變厚、基質(zhì)中出現(xiàn)成堆的顆粒狀和纖維狀異染物質(zhì)。如在飼料中加入20%的膽固醇，再同時注射同型半胱氨酸硫代內(nèi)脂，則全部動物出現(xiàn)顯著的動脈粥樣硬化病變。
5．注射表面活化劑法：給大白鼠腹腔注射Triton WR1339 300mg/kg，9小時后使血清膽固醇升高3－4；20小時后雄性大白鼠血清膽固醇仍為正常的3～4倍，而雌性大白鼠卻為6倍左右；用藥后24小時左右升脂作用達最高點，48小時左右恢復(fù)正常。其中以甘油三脂升高最強，其次是磷脂、游離脂肪酸及游離膽固醇，對膽固醇脂沒有影響。
6．膽固醇一脂肪乳劑靜脈注射法：將膽固醇及豬油各3g在電磁加熱攪拌下完全溶解后加入吐溫-803g，攪勻，再緩緩加入丙二醇5ml和沸水的混合液，充分?jǐn)嚢枞榛钩?00ml，經(jīng)抽濾后顯微鏡下檢查，乳劑顆粒均勻，并小于7～8μm即可應(yīng)用。給兔耳緣靜脈注射5ml/kg,可見血漿膽固醇及甘油三酯立即升高?？偰懝檀忌咧琳５?倍，其中主要是游離膽固醇，游離膽固醇和總膽固醇的比值為90%。以后血漿總膽固醇逐漸降低，6小時時出現(xiàn)一低峰，后略有回升。3～4天后游離膽固醇和總膽固醇的比值接近正常（40%左右），直到7～14天血漿膽固醇恢復(fù)正常。
7．幼乳大白鼠法：一般乳幼大白鼠的血清膽固醇高于或成年大白的2～3倍，這是由于乳汁中脂肪含量很高，而甲狀腺功能尚不健全的緣故。若用一般飼料取代乳汁喂養(yǎng)，則血清膽固醇很快就能降至正常成年大白鼠的水平。選用出生25天的乳幼大白鼠，雌雄兼用，體重30～50g，在不脫離母鼠乳汁喂養(yǎng)的條件下，進行實驗觀察藥物的降血膽固醇作用，與對照組比較效果。一般認(rèn)為這種高膽固醇血癥對甲狀腺素及其衍生物類藥物非常敏感，而對某些膽固醇生物合成抑制劑則不敏感。
8．其它方法：還有許多因素可誘發(fā)高脂血癥及動脈粥樣硬化癥。例如使動物腦部缺血、電刺激中樞神經(jīng)系統(tǒng)、高度應(yīng)激狀態(tài)、鳥類應(yīng)用大劑量雌激素和暴露于CO環(huán)境、氣囊異管損傷動脈壁內(nèi)皮細胞等。

小鼠肺炎模型構(gòu)建

動物適應(yīng)性喂養(yǎng)

動物房12h-12h晝夜交替，保持C57BL/6小鼠自由飲水、進食，溫度23-25℃，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后進入實驗。

C57BL/6小鼠肺炎模型建模

C57BL/6小鼠7%水合氯醛（0.5ml/100g）腹腔注射麻醉，麻醉成功后仰臥位固定于操作臺，頸部備皮、酒精棉球消毒，行頸部正中切口（約1.5cm），分離頸部皮膚、肌肉組織，暴露氣管，采用1ml注射器穿刺進針入氣管，按1ml/g緩慢滴注LPS（5mg/ml）溶液，注射完成后逐層縫合，回籠。

威斯騰實驗服務(wù)流程

威斯騰生物服務(wù)項目

【本平臺合作項目】
分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)、基因敲出/入、模式動物、SPF動物保種、病理學(xué)檢測、免疫學(xué)檢測、影像學(xué)檢測、原代培養(yǎng)、細胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量高內(nèi)涵篩選、藥效學(xué)評價、藥理毒理學(xué)實驗、慢病毒包裝與穩(wěn)轉(zhuǎn)株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析、知識產(chǎn)權(quán)服務(wù)！
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