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病理學(xué)檢測
常規(guī)(HE)染色技術(shù)

時(shí)間:2020-07-22 16:56:00 瀏覽:5633次


常規(guī)染色或HEHaematoxylin and eosin)染色。它是病理技術(shù)中最常用的一種方法,通過它可以做出病理診斷和發(fā)現(xiàn)尋求別的輔助方法,以達(dá)到準(zhǔn)確,完整的病理診斷。


一、病理染色

病理學(xué)的所有切片,都必須通過一種以上的染料,通過各種不同的方法,將切片中各種不同的物質(zhì),在不同染液的作用下,將其顯示出來,使之在光學(xué)顯微鏡下,能夠完全的觀看各種結(jié)構(gòu)。例如,HE染色,好質(zhì)量的切片可以清晰地顯示出許多不同的結(jié)構(gòu),細(xì)胞核著藍(lán)黑色,細(xì)胞漿著粉紅色,軟骨著藍(lán)色等。清晰的結(jié)構(gòu)為診斷提供可靠的依據(jù),因此,染色技術(shù)也是病理技術(shù)中的重要組成部分,必須不斷地總結(jié),方能提高。如果染色不好,切片染色一團(tuán)糟,紅藍(lán)不分,結(jié)構(gòu)不清,層次不明,影響了鏡下的觀察,直接影響了臨床診斷,染色結(jié)果的好壞直接關(guān)系到診斷的準(zhǔn)確性。


二、染色方法及步驟

1、脫水透明:

由低濃度到高濃度酒精作脫水劑,逐漸脫去組織塊中的水份。再將組織塊置于既溶于酒精,又溶于石蠟的透明劑二甲苯中透明,以二甲苯替換出組織塊的中酒精。

2、浸蠟包埋:

將已透明的組織塊置于已溶化的石蠟中,放入溶蠟箱保溫。待石蠟完全浸入組織塊后進(jìn)行包埋:先制備好容器,倒入已溶化的石蠟,迅速夾取已浸透石蠟的組織塊放入其中。冷卻凝固成塊。

3、切片與貼片:

將包埋好的蠟塊固定于切片機(jī)上,切成薄片, 5—8微米厚。切下的薄片放到加熱的水中燙平,再貼到載玻片上,放45℃恒溫箱中烘干。

4、人工蘇木素,伊紅染色法(HE法)
(1)
切片浸入二甲苯中5-10min
(2)
切片浸入二甲苯中5-10min;
(3)100%
酒精1min。
(4)100%
酒精1min
(5)95%
酒精1min。
(6)95%
酒精1min。
(7)90%
酒精1min。
(8)80%
酒精1min
(9)
自來水洗1min。
(10)
浸入蘇木素染液浸染10-15min
(11)
自來水洗30second-1min。
(12)1%
鹽酸酒精分化30second。
(13)
流水沖洗15min以上。
(14)1%
伊紅酒精染3-5min。
(15)90%
95%酒精分化30sec。
(16)95%
酒精30sec-1min。
(17)95%
酒精30sec-1min。
(18)95%
酒精30sec-1min。
(19)100%
酒精1min。
(20)100%
酒精1-2min。
(21)
碳酸二甲苯1min
(22)
二甲苯1-2min。
(23)
二甲苯1-2min
(24)
二甲苯1-2min
(25)
中性樹膠封固。


三、結(jié)果提供 細(xì)胞核被染成深藍(lán)黑色;細(xì)胞漿被染成粉紅色;軟骨及鈣鹽被染成藍(lán)色;膠原纖維染成淡粉紅色,嗜酸性細(xì)胞及嗜酸性顆粒呈鮮紅色;彈力纖維呈淡粉紅色;某些蛋白性物呈粉紅色等。

1、完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告(包含試劑、耗材、操作步驟、病理結(jié)果);

2、原始病理照片,一般提供100倍、400倍照片各2張;

3、如果客戶提供的是組織,我們提供石蠟塊、染色片


四、樣本要求:

取材保持組織新鮮(組織塊以小于2cm*1.5cm*0.3cm為宜),立即放入固定液(固定液用10%福爾馬林液或4%多聚甲醛緩沖液,體積為組織塊的10倍以上)中,避免干燥,4°冰箱保存

結(jié)果展示



威斯騰生物服務(wù)流程


威斯騰生物服務(wù)項(xiàng)目

分子生物學(xué)檢測 蛋白質(zhì)與免疫學(xué) 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
實(shí)時(shí)熒光定量PCR 單克隆抗體制備 帕金森疾病模型
免疫共沉淀(Co-IP) 多克隆抗體制備 抑郁癥動(dòng)物模型
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附法)技術(shù) Western-blot 實(shí)驗(yàn)服務(wù) 脊髓損傷模型
生化指標(biāo)檢測 蛋白雙向電泳實(shí)驗(yàn)服務(wù) 腦外損傷模型
雙熒光素酶報(bào)告基因檢測 原核蛋白表達(dá)純化 骨神經(jīng)損傷模型
染色質(zhì)免疫共沉淀(ChIP) 真核蛋白表達(dá)純化 心肌缺血模型
GST pull Down ITRAQ定量蛋白質(zhì)組學(xué) 心力衰竭模型
SLAC蛋白組學(xué) 肺動(dòng)脈高血壓動(dòng)物模型
高血壓模型
病毒包裝純化 實(shí)驗(yàn)課題整體外包 粥樣動(dòng)脈硬化模型
過表達(dá)/干擾慢病毒包裝純化 整體課題外包 大腦中動(dòng)脈阻塞模型
過表達(dá)/干擾腺病毒包裝純化 細(xì)胞整體實(shí)驗(yàn)外包 慢性之氣管炎模型
逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝純化 動(dòng)物整體實(shí)驗(yàn)外包 過敏性哮喘模型
腺相關(guān)病毒包裝純化 肺炎大鼠模型
肝炎-肝硬化-肝癌模型
蛋白芯片 原代細(xì)胞培養(yǎng) 肝纖維化模型
細(xì)胞因子芯片 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng) 膽結(jié)石模型
生長因子芯片 脂肪干細(xì)胞培養(yǎng) 急性胰腺炎模型
信號(hào)通路磷酸化水平檢測芯片 心肌成纖維細(xì)胞培養(yǎng) 急性腎衰竭模型
BioPlex懸浮芯片 軟骨細(xì)胞培養(yǎng) 體內(nèi)血栓模型
生長因子芯片 血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng) 關(guān)節(jié)炎模型
炎癥因子芯片 神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng) I型和II型糖尿病模型
血管生成因子芯片 內(nèi)皮組細(xì)胞原代培養(yǎng) 裸鼠成瘤
凋亡因子芯片 基因編輯動(dòng)物
趨化因子芯片 電生理相關(guān)服務(wù) 動(dòng)物整體實(shí)驗(yàn)服務(wù)
HuProt TM 20K人類蛋白組芯片 膜片鉗實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞生物學(xué) 高通量測序 代謝組學(xué)
細(xì)胞原代培養(yǎng) mRNA測序 氣相色譜GC/MS
MTT檢測 LncRNA測序 液相色譜LC/MS
細(xì)胞凋亡檢測 全基因組測序 核磁共震NMR
細(xì)胞周期檢測 RNA-Seq測序
細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn) 外顯子測序 影像學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)
Transwell細(xì)胞遷移/侵襲 16s擴(kuò)增子測序 Micro-CT
流式分選 Small RNA測序 小動(dòng)物活體成像
CCK8/XTT檢測 宏基因組測序 核磁共振
臺(tái)盼藍(lán)檢測細(xì)胞活性 單細(xì)胞測序 PET-CT
藥物篩選細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn) circleRNA測序
細(xì)胞粘附性檢測 甲基化測序 基因編輯動(dòng)物
細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn) 條件性敲除小鼠/大鼠
細(xì)胞生物學(xué)整體實(shí)驗(yàn) 全基因敲除小鼠/大鼠
細(xì)胞成管實(shí)驗(yàn)
病理學(xué)檢測 CRISPR/Cas9細(xì)胞敲除/敲入 基因芯片
掃描電鏡 基因定點(diǎn)突變細(xì)胞系 LncRNA芯片
透射電鏡 單基因敲除細(xì)胞系 miRNA芯片
HE染色 多基因敲除細(xì)胞系 mRNA芯片
免疫組化 目的基因敲入細(xì)胞系 甲基化芯片(限人和小鼠來源樣本)
Tunel(原位末端凋亡法)檢測 報(bào)告基因敲入細(xì)胞系 SNP芯片(限人和小鼠來源樣本)
激光共聚焦 miRNA/LncRNA敲除細(xì)胞系
免疫熒光
Masson染色 CRISPR/Cas9動(dòng)物敲除/敲入
原位雜交 基因敲除大鼠/小鼠
熒光原位雜交 基因敲入大鼠/小鼠
特殊染色(PSA、茜素紅、阿爾新藍(lán)等)
行為學(xué)檢測 藥物篩選服務(wù)項(xiàng)目 藥效學(xué)評價(jià)
水迷宮實(shí)驗(yàn) 高通量自動(dòng)藥物篩選平臺(tái) 神經(jīng)系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評價(jià)
曠場實(shí)驗(yàn) 細(xì)胞高內(nèi)涵藥物篩選平臺(tái) 抗腫瘤藥物藥效學(xué)評價(jià)
重復(fù)性刻板行為檢測 蛋白質(zhì)組學(xué)靶標(biāo)研發(fā)平臺(tái) 心血管系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評價(jià)
動(dòng)物跑臺(tái)檢測 分子藥理研究平臺(tái) 泌尿系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評價(jià)
強(qiáng)迫游泳 生物膜片鉗藥物篩選平臺(tái) 內(nèi)分泌系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評價(jià)
常規(guī)藥物體外篩選 抗炎免疫藥物藥效學(xué)評價(jià)


【本平臺(tái)合作項(xiàng)目】

分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、病理染色檢測、細(xì)胞敲除&敲入、模式與轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、SPF動(dòng)物保種、免疫學(xué)檢測、影像學(xué)檢測、原代培養(yǎng)、細(xì)胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量高內(nèi)涵篩選、藥效學(xué)評價(jià)、藥理毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)、慢病毒包裝與穩(wěn)轉(zhuǎn)株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析、知識(shí)產(chǎn)權(quán)服務(wù)!

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