
時(shí)間:2020-07-22 16:56:00 瀏覽:5633次
常規(guī)染色或HE(Haematoxylin and eosin)染色。它是病理技術(shù)中最常用的一種方法,通過它可以做出病理診斷和發(fā)現(xiàn)尋求別的輔助方法,以達(dá)到準(zhǔn)確,完整的病理診斷。
一、病理染色
病理學(xué)的所有切片,都必須通過一種以上的染料,通過各種不同的方法,將切片中各種不同的物質(zhì),在不同染液的作用下,將其顯示出來,使之在光學(xué)顯微鏡下,能夠完全的觀看各種結(jié)構(gòu)。例如,HE染色,好質(zhì)量的切片可以清晰地顯示出許多不同的結(jié)構(gòu),細(xì)胞核著藍(lán)黑色,細(xì)胞漿著粉紅色,軟骨著藍(lán)色等。清晰的結(jié)構(gòu)為診斷提供可靠的依據(jù),因此,染色技術(shù)也是病理技術(shù)中的重要組成部分,必須不斷地總結(jié),方能提高。如果染色不好,切片染色一團(tuán)糟,紅藍(lán)不分,結(jié)構(gòu)不清,層次不明,影響了鏡下的觀察,直接影響了臨床診斷,染色結(jié)果的好壞直接關(guān)系到診斷的準(zhǔn)確性。
二、染色方法及步驟
1、脫水透明:
由低濃度到高濃度酒精作脫水劑,逐漸脫去組織塊中的水份。再將組織塊置于既溶于酒精,又溶于石蠟的透明劑二甲苯中透明,以二甲苯替換出組織塊的中酒精。
2、浸蠟包埋:
將已透明的組織塊置于已溶化的石蠟中,放入溶蠟箱保溫。待石蠟完全浸入組織塊后進(jìn)行包埋:先制備好容器,倒入已溶化的石蠟,迅速夾取已浸透石蠟的組織塊放入其中。冷卻凝固成塊。
3、切片與貼片:
將包埋好的蠟塊固定于切片機(jī)上,切成薄片, 5—8微米厚。切下的薄片放到加熱的水中燙平,再貼到載玻片上,放45℃恒溫箱中烘干。
4、人工蘇木素,伊紅染色法(HE法)
(1)切片浸入二甲苯中5-10min;
(2)切片浸入二甲苯中5-10min;
(3)100%酒精1min。
(4)100%酒精1min。
(5)95%酒精1min。
(6)95%酒精1min。
(7)90%酒精1min。
(8)80%酒精1min。
(9)自來水洗1min。
(10)浸入蘇木素染液浸染10-15min。
(11)自來水洗30second-1min。
(12)1%鹽酸酒精分化30second。
(13)流水沖洗15min以上。
(14)1%伊紅酒精染3-5min。
(15)90%或95%酒精分化30sec。
(16)95%酒精30sec-1min。
(17)95%酒精30sec-1min。
(18)95%酒精30sec-1min。
(19)100%酒精1min。
(20)100%酒精1-2min。
(21)碳酸二甲苯1min。
(22)二甲苯1-2min。
(23)二甲苯1-2min
(24)二甲苯1-2min。
(25)中性樹膠封固。
三、結(jié)果提供 細(xì)胞核被染成深藍(lán)黑色;細(xì)胞漿被染成粉紅色;軟骨及鈣鹽被染成藍(lán)色;膠原纖維染成淡粉紅色,嗜酸性細(xì)胞及嗜酸性顆粒呈鮮紅色;彈力纖維呈淡粉紅色;某些蛋白性物呈粉紅色等。
1、完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告(包含試劑、耗材、操作步驟、病理結(jié)果);
2、原始病理照片,一般提供100倍、400倍照片各2張;
3、如果客戶提供的是組織,我們提供石蠟塊、染色片
四、樣本要求:
取材保持組織新鮮(組織塊以小于2cm*1.5cm*0.3cm為宜),立即放入固定液(固定液用10%福爾馬林液或4%多聚甲醛緩沖液,體積為組織塊的10倍以上)中,避免干燥,4°冰箱保存
結(jié)果展示
威斯騰生物服務(wù)流程
威斯騰生物服務(wù)項(xiàng)目
分子生物學(xué)檢測 | 蛋白質(zhì)與免疫學(xué) | 動(dòng)物實(shí)驗(yàn) |
實(shí)時(shí)熒光定量PCR | 單克隆抗體制備 | 帕金森疾病模型 |
免疫共沉淀(Co-IP) | 多克隆抗體制備 | 抑郁癥動(dòng)物模型 |
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附法)技術(shù) | Western-blot 實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 脊髓損傷模型 |
生化指標(biāo)檢測 | 蛋白雙向電泳實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 腦外損傷模型 |
雙熒光素酶報(bào)告基因檢測 | 原核蛋白表達(dá)純化 | 骨神經(jīng)損傷模型 |
染色質(zhì)免疫共沉淀(ChIP) | 真核蛋白表達(dá)純化 | 心肌缺血模型 |
GST pull Down | ITRAQ定量蛋白質(zhì)組學(xué) | 心力衰竭模型 |
SLAC蛋白組學(xué) | 肺動(dòng)脈高血壓動(dòng)物模型 | |
高血壓模型 | ||
病毒包裝純化 | 實(shí)驗(yàn)課題整體外包 | 粥樣動(dòng)脈硬化模型 |
過表達(dá)/干擾慢病毒包裝純化 | 整體課題外包 | 大腦中動(dòng)脈阻塞模型 |
過表達(dá)/干擾腺病毒包裝純化 | 細(xì)胞整體實(shí)驗(yàn)外包 | 慢性之氣管炎模型 |
逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝純化 | 動(dòng)物整體實(shí)驗(yàn)外包 | 過敏性哮喘模型 |
腺相關(guān)病毒包裝純化 | 肺炎大鼠模型 | |
肝炎-肝硬化-肝癌模型 | ||
蛋白芯片 | 原代細(xì)胞培養(yǎng) | 肝纖維化模型 |
細(xì)胞因子芯片 | 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng) | 膽結(jié)石模型 |
生長因子芯片 | 脂肪干細(xì)胞培養(yǎng) | 急性胰腺炎模型 |
信號(hào)通路磷酸化水平檢測芯片 | 心肌成纖維細(xì)胞培養(yǎng) | 急性腎衰竭模型 |
BioPlex懸浮芯片 | 軟骨細(xì)胞培養(yǎng) | 體內(nèi)血栓模型 |
生長因子芯片 | 血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng) | 關(guān)節(jié)炎模型 |
炎癥因子芯片 | 神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng) | I型和II型糖尿病模型 |
血管生成因子芯片 | 內(nèi)皮組細(xì)胞原代培養(yǎng) | 裸鼠成瘤 |
凋亡因子芯片 | 基因編輯動(dòng)物 | |
趨化因子芯片 | 電生理相關(guān)服務(wù) | 動(dòng)物整體實(shí)驗(yàn)服務(wù) |
HuProt TM 20K人類蛋白組芯片 | 膜片鉗實(shí)驗(yàn) | |
細(xì)胞生物學(xué) | 高通量測序 | 代謝組學(xué) |
細(xì)胞原代培養(yǎng) | mRNA測序 | 氣相色譜GC/MS |
MTT檢測 | LncRNA測序 | 液相色譜LC/MS |
細(xì)胞凋亡檢測 | 全基因組測序 | 核磁共震NMR |
細(xì)胞周期檢測 | RNA-Seq測序 | |
細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn) | 外顯子測序 | 影像學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn) |
Transwell細(xì)胞遷移/侵襲 | 16s擴(kuò)增子測序 | Micro-CT |
流式分選 | Small RNA測序 | 小動(dòng)物活體成像 |
CCK8/XTT檢測 | 宏基因組測序 | 核磁共振 |
臺(tái)盼藍(lán)檢測細(xì)胞活性 | 單細(xì)胞測序 | PET-CT |
藥物篩選細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn) | circleRNA測序 | |
細(xì)胞粘附性檢測 | 甲基化測序 | 基因編輯動(dòng)物 |
細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn) | 條件性敲除小鼠/大鼠 | |
細(xì)胞生物學(xué)整體實(shí)驗(yàn) | 全基因敲除小鼠/大鼠 | |
細(xì)胞成管實(shí)驗(yàn) | ||
病理學(xué)檢測 | CRISPR/Cas9細(xì)胞敲除/敲入 | 基因芯片 |
掃描電鏡 | 基因定點(diǎn)突變細(xì)胞系 | LncRNA芯片 |
透射電鏡 | 單基因敲除細(xì)胞系 | miRNA芯片 |
HE染色 | 多基因敲除細(xì)胞系 | mRNA芯片 |
免疫組化 | 目的基因敲入細(xì)胞系 | 甲基化芯片(限人和小鼠來源樣本) |
Tunel(原位末端凋亡法)檢測 | 報(bào)告基因敲入細(xì)胞系 | SNP芯片(限人和小鼠來源樣本) |
激光共聚焦 | miRNA/LncRNA敲除細(xì)胞系 | |
免疫熒光 | ||
Masson染色 | CRISPR/Cas9動(dòng)物敲除/敲入 | |
原位雜交 | 基因敲除大鼠/小鼠 | |
熒光原位雜交 | 基因敲入大鼠/小鼠 |
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特殊染色(PSA、茜素紅、阿爾新藍(lán)等) |
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行為學(xué)檢測 | 藥物篩選服務(wù)項(xiàng)目 | 藥效學(xué)評價(jià) |
水迷宮實(shí)驗(yàn) | 高通量自動(dòng)藥物篩選平臺(tái) | 神經(jīng)系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評價(jià) |
曠場實(shí)驗(yàn) | 細(xì)胞高內(nèi)涵藥物篩選平臺(tái) | 抗腫瘤藥物藥效學(xué)評價(jià) |
重復(fù)性刻板行為檢測 | 蛋白質(zhì)組學(xué)靶標(biāo)研發(fā)平臺(tái) | 心血管系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評價(jià) |
動(dòng)物跑臺(tái)檢測 | 分子藥理研究平臺(tái) | 泌尿系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評價(jià) |
強(qiáng)迫游泳 | 生物膜片鉗藥物篩選平臺(tái) | 內(nèi)分泌系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評價(jià) |
常規(guī)藥物體外篩選 | 抗炎免疫藥物藥效學(xué)評價(jià) |
【本平臺(tái)合作項(xiàng)目】
分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、病理染色檢測、細(xì)胞敲除&敲入、模式與轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、SPF動(dòng)物保種、免疫學(xué)檢測、影像學(xué)檢測、原代培養(yǎng)、細(xì)胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量高內(nèi)涵篩選、藥效學(xué)評價(jià)、藥理毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)、慢病毒包裝與穩(wěn)轉(zhuǎn)株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析、知識(shí)產(chǎn)權(quán)服務(wù)!
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