科研服務(wù) 時間：2020-07-21 15:42:00 瀏覽：4603次
基本原理
孔板實驗是Boissiex和Simon1962年首次建立的，此后被廣泛用于藥效研究。該實驗是利用新奇(curiosity)和恐懼(fear)兩個因素來控制動物在新環(huán)境下的行為，用逃避(escapes)
來反映這兩個因素的作用結(jié)果。動物反復(fù)鉆頭(head一dipping)反映其新奇感和對逃避的渴望。一般認(rèn)為，藥物在不影響動物運動活性的劑量下，增加鉆頭次數(shù)和時間，表現(xiàn)為抗焦慮作用，減少鉆頭次數(shù)和時間則為致焦慮作用。
操作步驟
大鼠和小鼠的實驗裝置有所不同。大鼠裝置為一個66cm x 56cm x 47cm的木箱，底板有4個直徑為3 . 8cm、深1
cm的等大圓孔，其中兩孔離最近壁14cm，另兩孔17cm，孔板水平抬高12em;小鼠木箱為44cm x 40cm x 27cm ,
4個孔的孔徑均為3cm，厚1. 8cm，每孔中心離最近壁的距離為l0cm。
80年代之后，孔板箱壁及每一孔周邊都裝有紅外光電管，并與微機相聯(lián)，這樣可同時自動記錄動物的鉆頭次數(shù)和鉆頭時間、運動活性及站立數(shù)等多項指標(biāo)，既提高了工作效率，又增加了實驗的可靠性。實驗用雄性成年的大鼠或小鼠。將動物置于孔板中央，背朝觀察者。動物兩眼消失在洞中為一次鉆頭(a
head一dip)，記錄5-10min的鉆頭次數(shù)及鉆頭持續(xù)時間。
注意事項與評價
（1）對孔板箱的形狀和大小沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，但常采用方型，其邊長在大鼠一般60cm,小鼠為40c m左右。
(2)孔的數(shù)量早期多為16孔，現(xiàn)在通常采用4孔板。
(3)動物在上午的鉆頭數(shù)往往比下午多。因此，應(yīng)盡量在每天固定的時間內(nèi)做實驗。
(4)本實驗對致焦慮藥(如BDZ受體反相激動劑)引起探究性鉆頭的特異性降低結(jié)果較為一致，而某些缺乏抗焦慮作用的藥物(如BDZ受體拮抗劑氟馬西尼)反可使探究性鉆頭增加。故在篩選未知藥物時應(yīng)結(jié)合其它焦慮模型進行評價。
威斯騰實驗服務(wù)流程
威斯騰生物服務(wù)項目
| 分子生物學(xué)檢測 | 蛋白質(zhì)與免疫學(xué) | 動物實驗 |
| 實時熒光定量PCR | 單克隆抗體制備 | 帕金森疾病模型 |
| 免疫共沉淀（Co-IP） | 多克隆抗體制備 | 抑郁癥動物模型 |
| ELISA（酶聯(lián)免疫吸附法）技術(shù) | Western-blot 實驗服務(wù) | 脊髓損傷模型 |
| 生化指標(biāo)檢測 | 蛋白雙向電泳實驗服務(wù) | 腦外損傷模型 |
| 雙熒光素酶報告基因檢測 | 原核蛋白表達(dá)純化 | 骨神經(jīng)損傷模型 |
| 染色質(zhì)免疫共沉淀（ChIP） | 真核蛋白表達(dá)純化 | 心肌缺血模型 |
| GST pull Down | ITRAQ定量蛋白質(zhì)組學(xué) | 心力衰竭模型 |
| SLAC蛋白組學(xué) | 肺動脈高血壓動物模型 | |
| 高血壓模型 | ||
| 病毒包裝純化 | 實驗課題整體外包 | 粥樣動脈硬化模型 |
| 過表達(dá)/干擾慢病毒包裝純化 | 整體課題外包 | 大腦中動脈阻塞模型 |
| 過表達(dá)/干擾腺病毒包裝純化 | 細(xì)胞整體實驗外包 | 慢性支氣管炎模型 |
| 逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝純化 | 動物整體實驗外包 | 過敏性哮喘模型 |
| 腺相關(guān)病毒包裝純化 | 肺炎大鼠模型 | |
| 肝炎-肝硬化-肝癌模型 | ||
| 蛋白芯片 | 原代細(xì)胞培養(yǎng) | 肝纖維化模型 |
| 細(xì)胞因子芯片 | 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng) | 膽結(jié)石模型 |
| 生長因子芯片 | 脂肪干細(xì)胞培養(yǎng) | 急性胰腺炎模型 |
| 信號通路磷酸化水平檢測芯片 | 心肌成纖維細(xì)胞培養(yǎng) | 急性腎衰竭模型 |
| BioPlex懸浮芯片 | 軟骨細(xì)胞培養(yǎng) | 體內(nèi)血栓模型 |
| 生長因子芯片 | 血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng) | 關(guān)節(jié)炎模型 |
| 炎癥因子芯片 | 神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng) | I型和II型糖尿病模型 |
| 血管生成因子芯片 | 內(nèi)皮組細(xì)胞原代培養(yǎng) | 裸鼠成瘤 |
| 凋亡因子芯片 | 基因編輯動物 | |
| 趨化因子芯片 | 電生理相關(guān)服務(wù) | 動物整體實驗服務(wù) |
| HuProt TM 20K人類蛋白組芯片 | 膜片鉗實驗 | |
| 細(xì)胞生物學(xué) | 高通量測序 | 代謝組學(xué) |
| 細(xì)胞原代培養(yǎng) | mRNA測序 | 氣相色譜GC/MS |
| MTT檢測 | LncRNA測序 | 液相色譜LC/MS |
| 細(xì)胞凋亡檢測 | 全基因組測序 | 核磁共震NMR |
| 細(xì)胞周期檢測 | RNA-Seq測序 | |
| 細(xì)胞克隆形成實驗 | 外顯子測序 | 影像學(xué)相關(guān)實驗 |
| Transwell細(xì)胞遷移/侵襲 | 16s擴增子測序 | Micro-CT |
| 流式分選 | Small RNA測序 | 小動物活體成像 |
| CCK8/XTT檢測 | 宏基因組測序 | 核磁共振 |
| 臺盼藍(lán)檢測細(xì)胞活性 | 單細(xì)胞測序 | PET-CT |
| 藥物篩選細(xì)胞學(xué)實驗 | circleRNA測序 | |
| 細(xì)胞粘附性檢測 | 甲基化測序 | 基因編輯動物 |
| 細(xì)胞劃痕實驗 | 條件性敲除小鼠/大鼠 | |
| 細(xì)胞生物學(xué)整體實驗 | 全基因敲除小鼠/大鼠 | |
| 細(xì)胞成管實驗 | ||
| 病理學(xué)檢測 | CRISPR/Cas9細(xì)胞敲除/敲入 | 基因芯片 |
| 掃描電鏡 | 基因定點突變細(xì)胞系 | LncRNA芯片 |
| 透射電鏡 | 單基因敲除細(xì)胞系 | miRNA芯片 |
| HE染色 | 多基因敲除細(xì)胞系 | mRNA芯片 |
| 免疫組化 | 目的基因敲入細(xì)胞系 | 甲基化芯片（限人和小鼠來源樣本） |
| Tunel（原位末端凋亡法）檢測 | 報告基因敲入細(xì)胞系 | SNP芯片（限人和小鼠來源樣本） |
| 激光共聚焦 | miRNA/LncRNA敲除細(xì)胞系 | |
| 免疫熒光 | ||
| Masson染色 | CRISPR/Cas9動物敲除/敲入 |
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| 原位雜交 | 基因敲除大鼠/小鼠 |
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| 熒光原位雜交 | 基因敲入大鼠/小鼠 |
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| 特殊染色（PSA、茜素紅、阿爾新藍(lán)等） |
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| 行為學(xué)檢測 | 藥物篩選服務(wù)項目 | 藥效學(xué)評價 |
| 水迷宮實驗 | 高通量自動藥物篩選平臺 | 神經(jīng)系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評價 |
| 曠場實驗 | 細(xì)胞高內(nèi)涵藥物篩選平臺 | 抗腫瘤藥物藥效學(xué)評價 |
| 重復(fù)性刻板行為檢測 | 蛋白質(zhì)組學(xué)靶標(biāo)研發(fā)平臺 | 心血管系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評價 |
| 動物跑臺檢測 | 分子藥理研究平臺 | 泌尿系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評價 |
| 強迫游泳 | 生物膜片鉗藥物篩選平臺 | 內(nèi)分泌系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評價 |
| 常規(guī)藥物體外篩選 | 抗炎免疫藥物藥效學(xué)評價 |
【本平臺合作項目】
分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、基因敲出/入、模式動物、SPF動物保種、病理學(xué)檢測、免疫學(xué)檢測、影像學(xué)檢測、原代培養(yǎng)、細(xì)胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量高內(nèi)涵篩選、藥效學(xué)評價、藥理毒理學(xué)實驗、慢病毒包裝與穩(wěn)轉(zhuǎn)株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析、知識產(chǎn)權(quán)服務(wù)！
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