
時間:2020-07-21 13:35:00 瀏覽:4263次
單鏈DNA (寡核苷酸)短片段的引物在生物技術領域如PCR 擴增、DNA 測序等實驗中,具有非常重要的作用。威斯騰生物技術服務中心擁有多年的引物合成經驗,熟練的專業(yè)技術人員,采用國際先進的DNA 合成儀,能為客戶精確合成各種類型的引物。
嚴格的質量控制:為了保證引物的質量和通量,金斯瑞配備了多臺先進的DNA合成儀,可以高質高效地為客戶精確合成各種類型的引物;金斯瑞也通過自動處理訂單,有效地避免了人為失誤,并提供RPC、PAGE、HPLC等多種純化方式,所有產品經過嚴格的質量抽檢后才發(fā)貨給客戶。
30多種引物標記服務:對引物進行熒光標記是分子生物學常用的研究手段,金斯瑞可以為客戶提供5' 或3' FAM、5'
HEX等30多種引物熒光標記服務。
引物合成周期短:幾乎所有引物的合成交貨時間不超過5個工作日。
合成能力:長度可達110 base。
發(fā)貨時間:從安排訂單之日起,4天內發(fā)貨。
純化方式:RPC純化、PAGE純化、HPLC純化。
合成報告:隨產品提供OD值、nmol數、分子量、Tm值等數據報告。
二、引物純化:
C18柱脫鹽 |
又稱為簡易反相柱,對DNA有特異性吸附,可被有機溶液洗脫,但不會被水洗脫,因此能有效地去除鹽分,但不能有效去除比目的片段短的小片段。該方法一般不會對普通PCR反應產生影響。對于需要用于測序、克隆的引物不能使用這個級別。 |
RPC純化 |
RPC純化是通過反相凈化濾芯 (Reverse Phase Cartridge) 對引物進行純化,純化原理與反相HPLC純化一樣。與反相HPLC比較,RPC是一種有效并且更加經濟的純化方式。反相凈化濾芯通常包含一種疏水基質如 C18的硅膠,能夠很好的吸附DNA,并且可以用水輕松地將切割下來的保護基團和短的引物片段從反相柱上洗掉。RPC純化的引物可以應用于DNA測序、 PCR及基因合成等。 |
PAGE純化 |
PAGE純化法是使用變性聚丙烯酰胺凝膠電泳,對引物DNA進行分離,然后從凝膠中回收目的DNA。PAGE純化法也是一種非常有效的DNA純化方法,純化后的DNA純度大于90%,對長鏈Oligo DNA (大于50 mer)的純化特別有效。 |
HPLC純化 |
HPLC純化是使用高效液相色譜的原理,對引物DNA進行純化。該方法用于分離純化或分析時能達到很高的純度和靈敏度。在引物DNA的分析和純化中,常用的有離子交換(ion-exchange)HPLC和反相(reverse-phase)HPLC。reverse phase HPLC:純度大于90%;ion exchange HPLC:純度大于95%,可以有效的去除N-1短片段。HPLC純化主要用于短鏈和修飾引物的純化。該法的缺點是成本較高,批量生產效率不高。
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三、修飾引物:
基團修飾:硫代修飾,稀有堿基(dI、dU),修飾基團(氨基、生物素、地高辛、巰基、磷酸化)。
熒光標記:FAM、TAMRA、FITC、TET、HEX、Cy3、Cy5等標記。
雙標記熒光探針:探針5' 端標記熒光基團,3' 端標記淬滅基團,采用組合純化方式,保證了探針的質量。
分子信標:呈發(fā)夾結構的莖環(huán)雙標記寡核苷酸探針,兩端的核酸序列互補配對,一端標記熒光基團,另一端標記淬滅基團,自由狀態(tài)下兩個基團靠近,熒光淬滅;與靶序列結合,分子信標構型改變,恢復熒光。
四、實驗周期
3-5個工作日
五、威斯騰服務流程:
六、威斯騰生物服務項目:
分子生物學檢測 | 蛋白質與免疫學 | 動物實驗 |
實時熒光定量PCR | 單克隆抗體制備 | 帕金森疾病模型 |
免疫共沉淀(Co-IP) | 多克隆抗體制備 | 抑郁癥動物模型 |
ELISA(酶聯免疫吸附法)技術 | Western-blot 實驗服務 | 脊髓損傷模型 |
生化指標檢測 | 蛋白雙向電泳實驗服務 | 腦外損傷模型 |
雙熒光素酶報告基因檢測 | 原核蛋白表達純化 | 骨神經損傷模型 |
染色質免疫共沉淀(ChIP) | 真核蛋白表達純化 | 心肌缺血模型 |
GST pull Down | ITRAQ定量蛋白質組學 | 心力衰竭模型 |
SLAC蛋白組學 | 肺動脈高血壓動物模型 | |
高血壓模型 | ||
病毒包裝純化 | 實驗課題整體外包 | 粥樣動脈硬化模型 |
過表達/干擾慢病毒包裝純化 | 整體課題外包 | 大腦中動脈阻塞模型 |
過表達/干擾腺病毒包裝純化 | 細胞整體實驗外包 | 慢性之氣管炎模型 |
逆轉錄病毒包裝純化 | 動物整體實驗外包 | 過敏性哮喘模型 |
腺相關病毒包裝純化 | 肺炎大鼠模型 | |
肝炎-肝硬化-肝癌模型 | ||
蛋白芯片 | 原代細胞培養(yǎng) | 肝纖維化模型 |
細胞因子芯片 | 骨髓間充質干細胞培養(yǎng) | 膽結石模型 |
生長因子芯片 | 脂肪干細胞培養(yǎng) | 急性胰腺炎模型 |
信號通路磷酸化水平檢測芯片 | 心肌成纖維細胞培養(yǎng) | 急性腎衰竭模型 |
BioPlex懸浮芯片 | 軟骨細胞培養(yǎng) | 體內血栓模型 |
生長因子芯片 | 血管內皮細胞培養(yǎng) | 關節(jié)炎模型 |
炎癥因子芯片 | 神經元細胞培養(yǎng) | I型和II型糖尿病模型 |
血管生成因子芯片 | 內皮組細胞原代培養(yǎng) | 裸鼠成瘤 |
凋亡因子芯片 | 基因編輯動物 | |
趨化因子芯片 | 電生理相關服務 | 動物整體實驗服務 |
HuProt TM 20K人類蛋白組芯片 | 膜片鉗實驗 | |
細胞生物學 | 高通量測序 | 代謝組學 |
細胞原代培養(yǎng) | mRNA測序 | 氣相色譜GC/MS |
MTT檢測 | LncRNA測序 | 液相色譜LC/MS |
細胞凋亡檢測 | 全基因組測序 | 核磁共震NMR |
細胞周期檢測 | RNA-Seq測序 | |
細胞克隆形成實驗 | 外顯子測序 | 影像學相關實驗 |
Transwell細胞遷移/侵襲 | 16s擴增子測序 | Micro-CT |
流式分選 | Small RNA測序 | 小動物活體成像 |
CCK8/XTT檢測 | 宏基因組測序 | 核磁共振 |
臺盼藍檢測細胞活性 | 單細胞測序 | PET-CT |
藥物篩選細胞學實驗 | circleRNA測序 | |
細胞粘附性檢測 | 甲基化測序 | 基因編輯動物 |
細胞劃痕實驗 | 條件性敲除小鼠/大鼠 | |
細胞生物學整體實驗 | 全基因敲除小鼠/大鼠 | |
細胞成管實驗 | ||
病理學檢測 | CRISPR/Cas9細胞敲除/敲入 | 基因芯片 |
掃描電鏡 | 基因定點突變細胞系 | LncRNA芯片 |
透射電鏡 | 單基因敲除細胞系 | miRNA芯片 |
HE染色 | 多基因敲除細胞系 | mRNA芯片 |
免疫組化 | 目的基因敲入細胞系 | 甲基化芯片(限人和小鼠來源樣本) |
Tunel(原位末端凋亡法)檢測 | 報告基因敲入細胞系 | SNP芯片(限人和小鼠來源樣本) |
激光共聚焦 | miRNA/LncRNA敲除細胞系 | |
免疫熒光 | ||
Masson染色 | CRISPR/Cas9動物敲除/敲入 |
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原位雜交 | 基因敲除大鼠/小鼠 |
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熒光原位雜交 | 基因敲入大鼠/小鼠 | |
特殊染色(PSA、茜素紅、阿爾新藍等) |
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行為學檢測 | 藥物篩選服務項目 | 藥效學評價 |
水迷宮實驗 | 高通量自動藥物篩選平臺 | 神經系統藥物藥效學評價 |
曠場實驗 | 細胞高內涵藥物篩選平臺 | 抗腫瘤藥物藥效學評價 |
重復性刻板行為檢測 | 蛋白質組學靶標研發(fā)平臺 | 心血管系統藥物藥效學評價 |
動物跑臺檢測 | 分子藥理研究平臺 | 泌尿系統藥物藥效學評價 |
強迫游泳 | 生物膜片鉗藥物篩選平臺 | 內分泌系統藥物藥效學評價 |
常規(guī)藥物體外篩選 | 抗炎免疫藥物藥效學評價 |
【本平臺合作項目】
分子生物學、細胞生物學、基因敲出/入、模式動物、SPF動物保種、病理學檢測、免疫學檢測、影像學檢測、原代培養(yǎng)、細胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學、代謝組學、高通量高內涵篩選、藥效學評價、藥理毒理學實驗、慢病毒包裝與穩(wěn)轉株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學分析、知識產權服務!
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